[과 수석, 평점 4.5 자료 인증사진 첨부] DNA 제한효소

소개글

화공생물공학실험 과목에서 A+ 학점을 받은 레포트 입니다.
두 학기 모두 평균 평점 4.5받은 학생입니다.
레포트를 작성할 때, 참고문헌을 꼼꼼히 다 기록해놓아 참고하시면 큰 도움되실 것이라 생각합니다.

목차

1. Abstract

2. Introduction
가. 실험 목적
나. 실험 이론

3. Materials & Methods
가. 실험 기구 및 시약
나. 실험 방법

4. Results

5. Discussion

6. Conclusion

7. Reference

본문내용

1. Abstract
해당 실험은 Lambda DNA를 임의의 제한효소 절단하고, 전기 영동을 통해 사용된 제한 효소를 Ape 파일과 비교하여 유추하는 실험이다. 직접 Agarose gel 전기영동을 해봄으로써, DNA의 구조, 전기 영동의 원리와 영향을 받는 요소, 제한효소가 작용하는 원리, 등을 파악한다.

2. Introduction
가. 실험 목표
Lambda DNA를 임의의 제한효소로 절단하여, Agarose gel 전기영동 통해 사용된 제한효소의 원리 및 DNA 형태와 구조를 분석한다.

나. 실험 원리
(1) 제한 효소
제한 효소는 제한 부위로 알려진 분자 내의 특정 인식 부위 또는 그 근처에서 DNA를 조각으로 절단하는 효소이다. 제한 효소는 광범위한 핵산 내 가수분해 효소 그룹의 한 종류이다. 제한효소는 일반적으로 5가지 유형으로 분류되는데, 5가지 유형은 구조가 다르고 인식 부위에서 DNA 기질을 절단하는지 또는 인식 부위와 절단 부위가 서로 분리되어 있는지 여부이다. DNA를 절단하기 위해, 모든 제한 효소는 DNA 이중 나선의 각 phosphate backbone (i.e. each strand)를 통해 두 개의 절개를 한다.

(2) I형 제한 효소
I형 제한 효소는 가장 먼저 확인되었으며 대장균의 두 가지 다른 변종(K-12 및 B)에서 처음 확인되었다. 이러한 효소들은 서로 다른 부위에서 절단되며, 인식 부위에서 무작위 거리(최소한 1000 bp)이다. 이러한 무작위 부위의 절단들은 DNA 전위 과정을 따르는데, 이것은 이러한 효소들이 분자 모터라는 것을 보여준다. 인식 부위는 비대칭이며, 두 개의 특정 부분, 즉 3-4개의 뉴클레오티드를 포함하는 부분과 4-5개의 뉴클레오티드를 포함하는 부분으로 구성되어 있으며, 약 6-8개의 뉴클레오티드의 비특이적 스페이서로 분리되어 있다. 이러한 효소들은 다기능적이며 표적 DNA의 메틸화 상태에 따라 소화 및 변형 활동을 제한할 수 있다.

참고 자료

박상진 외 3명, 『화공생물공학실험』, 2021-2, P. 5-8 (실험 강의 교재)
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Ampliqon, ”Loading Buffers“, https://ampliqon.com/en/pcr-enzymes/pcr-enzymes/loading-buffers/ accessed 2021년 9월 18일
Thermofisher, ”Buffer Set for Restriction Enzymes“, https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/B30#/B30 accessed 2021년 9월 18일
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Capricorn, ”GEL ELECTROPHORESIS“, https://capricorn.bc.edu/wp/pathways/strain-identification/gel-electrophoresis accessed 2021년 9월 18일
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Bioinformatics, ”ApE, a Plasmid editor“, https://www.bioinformatics.nl/molbi/SCLResources/ApE_and_lambda.htm accessed 2021년 9월 18일