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목차
Ⅰ. Introduction
1. Human dipeptidylpeptidase-4(hDPP-4)에 대한 설명
2. 실험목적
Ⅱ. 가설/가설도출 이유
Ⅲ. Method
1. 재조합 실험
2. PCR 실험
3. 등전점 전기영동법(Isoelectric focusing, isoelectric electrophoresis)
4. BCA 정량
5. Western blot analysis
IV. 참고문헌
본문내용
이번 실험에 앞서서 중요하게 다룰 유전자는 Human dipeptidylpeptidase-4(hDPP-4)이다. 이 유전자는 ‘DPP-4’이며, 또는 CD26이라는 단백질분해 효소를 만들어 내는데, 길이는 2301 nt 정도 된다.
다양한 기능을 가진 type Ⅱ transmembrane glycoprotein으로 단백질 및 펩타이드의 아미노 말단에서 두 번째 아미노산이 프롤린이나 알라닌일 때 그 말단에서 2개의 아미노산을 제거하는 역할을 한다. 이 효소가 주로 상대하는 기질은 80개 이내의 크기인 펩타이드가 대부분으로 GLP-1 및 GIP 외에 neuropeptide와 chemokine 등을 포함한 35개 이상이 이 효소의 기질로서 작동을 한다. 이를 바탕으로 이 효소는 성장 인자, 케모카인, 신경 펩티드 그리고 혈관 활성 펩티드를 포함하여 상당히 광범위하게 거의 모든 기질들을 절단을 한다. 대표적으로 neuropeptide Y, peptide YY, substance P 그리고 stromal cell-derived factor 1 등이 있다.
그래서 이 효소는 대부분의 세포 유형의 표면에서 많이 발견된다. 주로 면역, 신호전달, 아픕토시스와 관련이 있으며, 그 예시로 상피세포, T 림프구같은 면역세포, 혈관 내피세포, 신장, 간, 부신, 골격근, 췌장, 폐, 소장, 골수, 비장 등 나타날 수가 있다. 제 2형 막 관통 당 단백질로 이루어져 있다. 하지만 관통되지 않고 혈장과 체액에 존재하는 경우들이 있다. 이 효소는 아데노신 데 아미나제와 특이적으로 높은 친화도로 결합을 하며 포도당 대사에서 GLP-1같은 인크레틴 분해를 담당하는 중요한 역할을 한다.
이 효소는 주로 당뇨병 같은 대사질환에서 주로 많이 다루는데, 제2형 당뇨병 환자들에게 주로 많이 보인다고 한다. 이 DPP-4는 효소활성과 더불어 fibroblast activation protein α (FAPα)..
<중 략>
참고 자료
김지윤, 박미령, 변승준, 오건봉, 양현, 정학재, 김경운. 2017. 사람 Dipeptidylpeptidase-4 (hDPP-4) 형질전환 돼지 염색체에 삽입된 외래 유전자 삽입위치 분석. 한국동물번식학회. Volume 41 No 2 Supplement.
이대호. 2014. Dipeptidyl Peptidase-4 (DPP-4) 억제제. 대한내과학회지: 제 87 권 제 1 호.
한상기(S . K . Han), 정의용(E . Y . Chung), 신유철(Y . C . Shin), 양교석(K . S . Yang). 1992. 논문 ; 육종 번식 : 등전점전기영동법에 (等電點電氣泳動法) 의한 제주재래마 Hb 단백질의 유전적 다형현상에 관한 연구. 한국축산학회. 34권 6호.
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