그람염색

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실험목적
: 그람(Gram) 염색에 의한 세균 감별 염색(differential staining)방법과 염색의 원리를 익히고, 미생물의 그람 양성(GRAM+) 및 그람 음성(GRAM-)을 판단해 본다.

방법
- 도말과 고정
➀ 알코올 램프에 사용할 loop를 멸균한다.
➁ loop로 소량의 균을 떠서 슬라이드글라스 위에 잘 도말한다.
➂ 도말한 슬라이드 글라스를 공기 중에서 자연 건조 시키거나, 준비된 키친 타올로 흡수하듯 닦아낸다.

- 그람 염색
➀ 슬라이드글라스에 Crystal violet을 2~3방울 떨어뜨리고 1분간 염색한다.
➁ 시간이 되면, 약하게 흐르는 물에 헹군 다음, 물기를 제거한다.
➂ iodine으로 1분간 매염한다.(염색약이 탈색되지 않도록 주의한다.)
➃ 시간이 되면, 약하게 흐르는 물에 헹군 다음, 물기를 제거한다.
➄ 슬라이드글라스에 Ethyl alcohol 95%로 30초미만 으로 탈색한다.

참고 자료

김경훈 외 8인. 『대학 생물학 실험』. pp. 114-120.
Reece 외 3인.『Campbell biology concepts&connections』. pp. 290-291.

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