Advanced Research of Capillary Electrophoresis (모세관 전기영동법)

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첫 째로, DNA sequencing에 Capillary Electrophoresis가 쓰일 수 있다. 우선 sequenced되기 위한 DNA, primer, DNA polymerase, 4개의 dNTP, 그리고 4개의 다른 fluorochrome labels가 붙은 4개의 ddNTP를 준비한다. 약 96도에서 가열하여 dsDNA를 ssDNA로 분리하고, 약 50도로 냉각하여 ssDNA에 primer를 붙인다. 그리고 약 60도로 온도를 조금 올려서 DNA polymerase를 부착하면 synthesis가 진행된다. 셀 수 없는 수의 ssDNA가 partially double-stranded DNA로 합성되다가, ddNTP와 만나는 순간 각 fragment의 합성이 종결된다. 그리고 다시 96도로 가열하여 모두 ssDNA로 바꾸면, 다양한 길이를 가지는 fragment를 얻는다. 이를 이제 capillary electrophoresis system의 inlet 부위에 넣어야 한다.

참고 자료

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