일반생물학및실험 Plasmid DNA 분리

목차

Ⅰ. 실험목적
Ⅱ. 배경지식
Ⅲ. 가설설정
Ⅳ. 실험방법
Ⅴ. 결과
Ⅵ. 고찰
Ⅶ. 참고문헌

본문내용

Ⅰ. 실험목적
Plasmid DNA 분리 실험을 통해 gene cloning 원리를 이해한다.

Ⅱ. 배경지식

1. Plasmid DNA

1-1. Plasmid DNA
생장에 필수적인 염색체 DNA에서 물리적으로 분리되어 있는 대표적은 에피솜 DNA 분자를 이른다. 1952년 미국의 유전학자 J. 레더버그가 최초로 플라스미드를 세균의 염색체 이외의 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자라는 의미로 명명하였다. 세포내에서 세대를 통하여 안정하게 자손에게 유지된다. 전달됨에도 불구하고 염색체와는 별개로 존재하며 자율적으로 증식하는 유전자의 총칭이다. 일반적으로 그 유전자는 세포의 생존에 있어서 필수적인 것은 아니지만 특정 환경에 생존하는데 필요한 소수의 유전자를 보유한다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자 삽입을 하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다.

1-2. pET-41a(+) DNA와 구성요소

1) T7 promoter : 박테리오파지 T7의 promoter sequence. RNA 중합효소들과 강한 친화력을 가지므로 다음 유전자를 강하게 발현시키며 이 경우 카나마이신 저항성 유전자의 발현을 위해 포함 된다.
2) T7 plyA : T7 아데닐산중합반응 신호이다. 전사 과정을 종료하고 ply A tail을 붙이는 역할을 한다.

참고 자료

네이버 지식백과] 플라스미드 [plasmid] (미생물학백과 )
[네이버 지식백과] 플라스미드 [plasmid] (생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 강영희)
[네이버 지식백과] 플라스미드 [plasmid] (두산백과)
pET-41a(+) DNA vector map, https://www.snapgene.com/
Cloning vector의 구성요소 : pET-41a(+) vector를 예로, https://blog.naver.com/underheaven/
140078600538
[네이버 지식백과] DNA 추출 [DNA extraction] (미생물학백과 )
플라스미드(Plasmid) DNA 분리 – 원리(Principle)와 방법(Methods), https://blog.naver.com/nan
ohelix/70180385720
DNA 농도 및 순도 측정, http://blog.naver.com/nanohelix/70179162449
식품의약품안전처, https://www.foodsafetykorea.go.kr/foodcode/01_03.jsp?idx=777
KOREA SCIENTIFICS, 전기영동의 원리와 실험
[네이버 지식백과] DNA 재조합 기술 [recombinant DNA technique] (동물학백과)