[일반생물학실험]DNA Electrophoresis

소개글

"[일반생물학실험]DNA Electrophoresis"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 기구 및 시약
1) 실험 재료

3. 실험 방법
1) Agarose gel 만들기
2) 전기영동 내리기

4. 실험 결과
1) 결과 분석

5. 토의 사항
1) 실험 고찰

본문내용

1.1. 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기에 다라 다르므로 매질 내에서 종류에 따라 분리하게 되며 전기영동은 DNA의 크기에 따른 분리를 한다.

1.2. PCR(Polymerase Chain Reaction)
PCR은 1983년에 Kary Mullis이라는 미국 생화학자에 의해 개발되었다. PCR은 작은 부분의 DNA나 유전자를 증폭시키는 기술이다. PCR은 의료계나 생물학에서 자주 사용되는데, DNA의 연구와 유전적인 조작을 하기 위해 다수의 DNA사본을 얻기 위해 이용되기도 하며 감염을 일으키는 병원균을 감지하기 위해서도 사용될 수도 있다. PCR를 사용하는 이유는 DNA을 연구하는 데 있어서 그 양이 너무 적기 때문에 짧은 DNA를 여러 번 복사함으로써 충분한 짧은 DNA를 얻기 위함이다. PCR진행을 위해서는 4가지 중요한 물질이 준비되어야 한다. 그것은 DNA template, primer, dNTPs, taq polymerase이며 buffer또한 정확한 실험환경 조성에 중요한 준비물이다.
PCR은 3단계로 나눠진다. Denaturing, Annealing, Extending이 그것이다. Denaturing단계에서는 이중가닥의 DNA template가 90℃ 정도의 열이 가해졌을 때 두 개의 단일가닥으로 분해되어 변성되는 과정이다. Annealing단계에서는 온도가 54℃ 정도로 낮아지며 DNA primer들이 단일가닥 DNA template에 결합하는 과정이다. 결합이 일어나기 전에 DNA primer을 제작해야 하는데, DNA template의 3’말단 부위의 염기서열에 상보적인 서열로 제작된다.

참고 자료

Campbell Biology, Jane Reece, Pearson, 2014 p.414∼417