Bradford assay 방법 - 단백질 정량 분석 실험 보고서
- 최초 등록일
- 2021.05.10
- 최종 저작일
- 2021.05
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소개글
Bradford Assay Method를 통하여 단백질의 양을 정량하는 실험
목차
1. 실험목적
2. 이론 및 원리
1) 단백질의 정량법
2) Lambert Beer의 법칙
3. 시약 및 기구
4. 실험방법
5. 결과
6. 고찰
7. 참고문헌
본문내용
1. 실험 목적
Bradford Method를 통하여 단백질의 양을 정량한다.
2. 이론 및 원리
1. 단백질의 정량법
1) Bradford assay 방법
이 실험에서 사용된 Bradford 방법은 실험방법이 빠를 뿐 아니라 비단백질 성분들에 의한 방해도 거의 없다. 이 방법은 발색반응이 2분 이내에 완결되며 1시간 까지 안정성이 유지된다. Bradford 방법의 감도는 Lowly 방법보다 좋으며, 미량 정량법을 사용하면 1~20μm의 단백질을 측정할 수 있다. Coomassie brilliant blue 염료 사용 시에는 phosphoric acid, methanol의 혼합물로 된 것을 사용한다. 사용 전에 이 염료 시약을 증류수로 5배 희석하여 여과한 후 유리용기에 담아 실온에서 보관한다. 이 희석용액은 2주간 안정하다.
그림 1 Coomassie brilliant blue G-250
산성용액에서 Coomassie brilliant blue 염료(그림 1)는 단백질의 arg, trp, tyr, his, phe에 결합하게 되고, 이로 인해 염료의 최대 흡광도는 465nm에서 595nm로 이동하게 된다.
참고 자료
식품가공학
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고급영양학 / 변기원,이보경,권종숙, 김경민, 김숙희 지음 / 교문사.