Plasmid DNA의 추출

소개글

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목차

1. 실험결과
2. 고찰
3. 참고문헌

본문내용

이번에는 대장균에서 플라스미드 DNA(supercoiled plasmid)를 추출하는 실험을 진행했다. Plasmind DNA를 분리할 때 Alkali lysis method를 이용했다. 먼저 대장균의 세포벽을 먼저 무너뜨린다. 여기서 칼슘 이온을 제거해 세포벽을 무너지게 하는 EDTA가 사용된다. EDTA, sucrose, RNase, Tris 모두 재현탁 과정에서 사용되는 PD1 buffer에 들어있다. sucrose는 세포의 형태를 유지해주는 역할, RNase는 RNA를 분해해 제거하는 역할, Tris는 완충제로 pH의 변화를 최소화시켜준다. 다음에는 세포를 용해하는데 PD2 buffer가 이용된다. SDS와 NAOH가 들어있는데 SDS는 세포막을 녹이고 NAOH는 염기 역할을 한다. DNA는 염기에 반응해 모두 변성된다. 우리가 추출할 작은 supercoiled plasmid는 심각하게 변성되지 않는다.

참고 자료

창의공공교양교육부 교양생물. 「생물학 및 실험Ⅰ」.
강영희. 「생명과학대사전」. 아카데미서적(2008).
네이버 백과사전. Tris.
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=436213&cid=42411&categoryId=42411
네이버 백과사전. DNA 파장.
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=435539&cid=42411&categoryId=42411