유전자 재조합 기술 (Recombinant DNA Technology)

소개글

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목차

Ⅰ. 서론

Ⅱ. 재료 및 방법
1. 실험재료
2. 실험방법

Ⅲ. 결과

Ⅳ. 논의

본문내용

유전자 재조합이란 특정 표현형으로 발현하는 DNA를 확인하고 분리해낸 DNA 단편을 다른 DNA 단편과 융합시켜 재조합 DNA를 만드는 기술로 유전자 재조합을 한 후 증폭을 통해 재조합한 DNA를 다량 얻어야 하므로 조작이 쉽고 클로닝이 가능한 플라스미드 DNA를 주로 사용한다(서 등, 2004; Campbell et al., 2009).
플라스미드 DNA란 벡터로 가장 많이 사용되는 것으로, 염색체와 독립하여 존재하지만 복제가 가능하며, 때로는 염색체에 삽입이 가능한 염색체 외의 DNA로 안정적으로 유전되지만 숙주 세포의 생장과 복제에는 필요하지 않은 부분이다. 이러한 플라스미드 DNA는 불필요한 부분을 제거하고 필요한 부분을 첨가하여 최소한의 크기와 기능을 갖는 형태로 재구성하여 사용한다(최, 2004).
DNA 단편을 다른 DNA 단편으로 옮기는 유전자 재조합 기술에는 기본적으로 DNA 단편을 만들어주어야 하는데 이 때 제한효소를 사용한다. 제한효소는 박테리아에 원래 존재하는 효소로 외부로 오는 DNA를 제한하고 핵산의 내부를 절단하는 효소이다. 절단을 할 때는 특수한 염기서열을 인지하여 그 부위를 절단하는 제한효소 Ⅱ형을 유전자 재조합 실험에 사용하며, 제한효소가 인지하는 염기의 수에 따라 다르게 구분할 수 있다(김 등, 2007).
원하는 DNA 단편을 만들었다면 이번엔 붙여주는 일을 하는 것이 필요한데 이 일은 리가아제가 담당한다. 리가아제는 이중가닥 DNA 분자의 한쪽 가닥에 생긴 nick을 연결해주는 효소로 한쪽 인산과 인접한 뉴클레오티드의 당 사이의 결합을 촉진시켜주어 결합을 유도하기 때문에 벡터로 쓰일 DNA말단의 Self ligation을 막기 위해 먼저 탈 인산화를 시켜 막아 주어야한다(미생물면역분과위원회, 2005).
재조합된 DNA는 100% 모두 완벽하게 재조합이 되는 것이 아니기 때문에 이를 확인하기 위해 재조합된 DNA를..

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참고 자료

강호일. 2006. 전기영동 최신 프로토콜. 초판, 월드사이언스, 14-25pp, 157-177pp.
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김병오, 유민, 이혜영. 2007. 미생물실험서. 초판, 보문각, 54-78pp. 91-113pp.
김충환, 박미숙, 범진필, 송재영, 유일준, 이원유, 전수진. 2004. 밀레니엄 미생물학. 3판, 정문각, 31-37pp.
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서영훈 외 6인 공역. 2004. 일반미생물학. 초판, 라이프사이언스, 289-326pp.
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