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2020_단백질정량분석_결과3

15864145132
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최초 등록일
2020.12.17
최종 저작일
2020.09
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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result & Discussion
4. Conclusion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험은 Lowry 법을 이용하여 다양한 농도를 가진 단백질 시료 용액을 정량하는 실험이다. 먼저 다양한 농도로 희석시킨 BSA용액 5개와 미지 농도의 BSA용액 1개에 Lowry Reagent와 Folin Reagent를 순서대로 넣고 기다린 뒤 각 용액의 색의 변화를 관찰한다. 그리고 UV/Vis spectrophotometer를 이용해 파장에 따른 흡광도를 측정해 최적의 파장대를 찾고, 이 파장대에서의 각 용액의 흡광도를 측정한 뒤 BSA Standard Curve를 그린다. 이 그래프의 직선의 방정식을 이용해 미지농도 용액의 단백질 시료의 농도를 계산한다. 또한, 용액의 색의 진하기와 단백질 농도, 흡광도가 어떠한 관계인지 분석한다.

2. Experiment
이번 실험에 사용될 시약은 BSA 원액, Lowry’s reagent, Folin reagent, 증류수이다.

Fig 1. Lowry’s reagent

Fig 2. Folin reagent

먼저, BSA 원액을 증류수로 희석하여 만든 다양한 농도의 단백질 용액과 미지 용액에 Lowry’s reagent를 넣고 pipetting 하여 섞어준 후 20분간 반응시킨다.

참고 자료

광운대학교 화학공학과 2020년도 2학년 2학기 실험노트
4번 실험 예비레포트
분석화학, 제 8판, Daniel C. Harris, 자유아카데미, page 439
William L. Masterton Cecile N. Hurley Edward J.Neth, 화학교재연구회, 2014, 마스터톤의 일반화학, 사이플러스, page 347~361
부성희 외 4인, 생화학실험 2판, 39p~50p
대한생화학 분자생물학회, 실험 생화학, 46p~51p
Ninfa, Alexander J. (2010). Fundamental Laboratory Approaches for Biochemistry and Biotechnology. Wiley. page. 117–118
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