소개글
본 리포트는 Western blot의 과정 중 SDS-PAGE, Transfer, Blocking에 관한 실험 과정과 결과가 담긴 리포트입니다.
참고하시어 좋은 결과 쟁취하시기 바랍니다.
목차
1. Date
2. Title
3. Purpose
4. Materials
5. Method
가. SDS-PAGE
나. Transfer
다. Blocking
6. Result
가. Transfer 후 NC membrane
7. Discussion
가. SDS-PAGE의 원리
나. NC membrane의 특징
다. Blocking을 하는 이유
8. Remark
9. Reference
본문내용
1. Date : 2020.05.31
2. Title : Western blot Ⅰ (SDS-PAGE & Transfer & Blocking)
3. Purpose :
가. SDS-PAGE을 통해 시료에 포함된 단백질을 크기별로 분리할 수 있음.
나. SDS-PAGE로 분리한 단백질을 NC membrane에 Transfer할 수 있음.
다. 항체의 비특이적 결합을 막기 위해 blocking buffer(skim milk)로 membrane을 Blocking할 수 있음.
4. Materials : 1,000ml 병, 증류수, Autoclave 확인용 스티커, 10x TBS(10x Tris-Buffered Saline), S1 pipette filler, Tween 20, 마이크로 피펫, 피펫팁, 1,000ml 비이커, 10x Tris-Glycine SDS Running Buffer, plastic wrap, 25x Tris-Glycine Transfer Buffer, methanol(MeOH), Buffer tank, Sample loading guide, 12% acrylamide gel, Electrophoresis module, protein marker, WT sample, KO sample, Power supply, cell lid, 자석 교반기, Tray, Tank, Magnetic bar, Transfer module, Ice, 15ml tube, Form pad, Gel releaser, 집게, Gel holder cassette, filter pad, NC membrane, skim milk(powder), 정밀전자저울, 50ml tube, 시약스푼, 70% 에탄올, Western blot box
참고 자료
weebly, “SDS-PAGE for Protein Resolution”, 2020.06,
https://nfsc4500101groupa.weebly.com/sds-page-for-protein-resolution.html.
DYNEBIO, “Western Blot”, 2020.06,
http://www.dynebio.co.kr/yc/bbs/board.php?bo_table=data1&wr_id=14&sst=wr_hit&sod=asc&sop=and&page=3.
Antibody Center, “TechNote(Western Blot)”, 2020.06,
file:///C:/Users/user/Downloads/Western+Blot-%EC%A0%95%EC%A7%80%EC%9D%80(Antibody+Center).pdf.
abcam, “Transfer and staining of proteins in western blot”, 2020.06,
https://www.abcam.com/protocols/transfer-and-staining-of-proteins-in-western-blot.