전기 영동(electrophoresis) 법에 의한 시료분석, Quantification of protein with Bradford assay 실험레포트

소개글

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목차

1. Title
2. Purpose
3. Introduction
4. Materials
5. Methods :
6.Results
7. Discussion
8. Project
9. Reference

본문내용

1. Title : 전기 영동(electrophoresis) 법에 의한 시료분석,
Quantification of protein with Bradford assay
4. Purpose : 1) 정제한 Recombinant Plasmid를 발현에 적합한 Cell에 Transformation 해준 뒤 원하는 단백질을 발현시키고 단백질 정제 과정을 거쳐 순수한 단백질을 얻어 낼 수 있고 SDS-PAGE를 통하여 Target 단백질이 잘 정제되었는지 확인한다.
2) 미지의 단백질 시료의 농도를 표준 단백질의 흡광도를 이용한 표준곡선을 이용해 알아내는 방법을 습득한다.
5. Introduction :
- 전기 영동(Gel electrophoresis)는 DNA나 단백질을 크기에 따라 분리하는 방법이다. 전기적 특성에 따른 분리를 한다. DNA는 인산기 때문에 음전하를 띠어 위와 같은 방식이 가능하다.
- Buffer solution에는 TAE와 TBE가 있으며 TAE는 비교적 크기가 큰 DNA에 사용하며 TBE는 비교적 크기가 작은 DNA에 사용한다.
- EtBr은 자외선을 받아 가시광선으로 파장을 변화시키는 일종의 형광물질로 전기 영동에서 핵산을 표지 한다.
- DNA loading dye는 well에 DNA를 넣어줄 때 DNA를 무겁게 하여 가라앉혀준다. 푸른빛을 띠면서 DNA가 전기 영동 된 정도를 알 수 있다.
- 전기영동의 속도는 DNA 분자의 크기가 클수록 느리게 이동하며 Agarose 농도가 높을수록 느리게 이동한다.

참고 자료

네이버지식백과/ 정성분석/ 생명과학 대사전/ https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=421900&cid=42411&categoryId=42411
위키백과/ Spectrophotometry/ https://en.wikipedia.org/wiki/Spectrophotometry (2018-06-12 방문)
위키백과/ Lowry protein assay/ https://en.wikipedia.org/wiki/Lowry_protein_assay
레닌저의 생화학/ 월드사이언스/윤경식, 김호식/ 2014/ p.80.