포항공대 화학생명공학실험[포스텍 A]Final-Report (Mini-prep for TA Cloning & DNA Seuquencing)

소개글

포항공대 화학공학과 전공필수 과목인
화학생명공학실험 보고서입니다
PRE-Report 는 실험전 사전지식을 정리하는 보고서이고
Final-Report는 실험후 결과를 정리하는 보고서 입니다.

두가지를 모두 참고하셔서 과제에 도움이 되시길 바랍니다.

목차

1. 실험 제목

2. Data 및 결과

3. 토의
1) 왜 재 실험한 colony는 파란색이 아니라 흰색이었을까?
2) 이론상 band의 위치와 실제 band 위치 차이는 어느 정도인가? 또한 조별로 차이가 왜 나는가?
3) Sequencing에 사용된 M13 primer는 무엇인가?
4) Sequencing 결과가 조마다 다른데 어떤 조가 성공적으로 dna를 합성했는가?

4. 결론

본문내용

1. 실험 제목
Mini-prep for TA Cloning & DNA Seuquencing

2. Data 및 결과
재 실험 결과 white colony가 정상적으로 발현되었음을 확인할 수 있다. Colony가 한 곳에 집중되어 있는 것이 아니라 전체적으로 퍼져있다. 한 곳에만 집중되어 있었던 2조의 white colony와 다른 결과를 보여준다. 또한 지난 번 2조의 colony는 경계선이 명확하지 않고 크기가 조금 컸지만 재 실험하여 생긴 colony는 경계가 명확하고 colony 하나의 크기가 매우 작다.

실험 결과 1kbp ladder와 100bp ladder, 그리고 4개의 조 모두 정상적으로 전기영동 됨을 확인 할 수 있다. 1조부터 4조까지 모두 비슷한 위치에서 band가 형성되었다. 하지만 2조의 경우 그 색깔이 타 팀에 비해서 훨씬 뚜렷하고 살짝 밑으로 내려와 있음을 확인할 수 있다. 또한 DNA가 전기영동 되면서 생기는 흔적이 흐릿하지만 보인다. 다른 조에서는 발견할 수 없는 흔적이 존재한다.

Base pair 가 53~775 번까지 722bp 의 길이가 측정되었다. 하지만 염기서열 중간 중간 확인 되지 않는 염기들이 존재한다. (너무 길어서 서열의 일부만 캡쳐)

참고 자료

Sambrook et al, Molecular Cloning 3rd Ed. Vol.1, Chapter 1
A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase, Sanger Frederick, J. Mol. Biology, 1975, 94, P.441~446