포항공대 화학생명공학실험[포스텍 A]Final-Report (Restriction enzyme Digestion & Gel purification)

소개글

포항공대 화학공학과 전공필수 과목인
화학생명공학실험 보고서입니다
PRE-Report 는 실험전 사전지식을 정리하는 보고서이고
Final-Report는 실험후 결과를 정리하는 보고서 입니다.

두가지를 모두 참고하셔서 과제에 도움이 되시길 바랍니다.

목차

1. 실험 제목
2. Data 및 결과
3. 토의
4. 결론
5. 참고문헌

본문내용

3. 토의
1) 왜 band 가 하나밖에 나오지 않았을까?
먼저 정상적인 경우 pet vector가 위쪽에 하나 ds-red가 아래에 하나 총 2개의 band가 생겼어야 했다. 그러나 우리가 실험한 결과 위쪽에만 하나의 band가 생겼다. 이는 vector와 insert가 서로 분리되지 않았음을 의미한다. 또는 분리되었더라도 소량만 분리되어 즉 enzyme의 효율이 떨어져서 전기영동으로 확인할 수 없었을 것이다.

2) 왜 vector와 insert가 분리되지 않았을까?
이번 실험에서 사용한 restriction enzyme는 두 개였다. N de I와 X ho I 이 두 개를 사용하였는데 그 이유는 double digestion을 해서 insert가 잘 삽입되게 하기 위함이었다. 그러나 우리의 예상과는 다르게 두 enzyme가 제대로 작동하지 않았다. 우리가 사용한 insert한 ds-red의 염기서열을 자세히 관찰해보니 N de I가 인식하는 염기서열은 존재 하였으나,......<중 략>

참고 자료

“1998 Biochemical Catalog”, Boehringer Mannheim
Sambrook et al Molecular Cloning 3rd Ed. Vol.1 Chapter 1
Vogelsten et al Preparation and analytical purification of DNA from agarose. PNAS 1979,76, 615-619