생명과학실험/생명공학실험 - SDS-PAGE 레포트

소개글

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SDS-PAGE 원리와 고찰이 꼼꼼하게 상세하게 담겨 있습니다.
A+받았던 레포트입니다. 도움되시길 바랍니다.

목차

1.실험날짜
2.주제
3.목표
4.Introduction
5.실험도구
6.실험방법
7. 실험결과
8. Discussion

본문내용

2.주제: SDS-page의 원리를 이해한다.

3.목표: Gel loading sample을 SDS-PAGE를 통해 size별로 분리한 후, 단백질을 염색시켜 Protein marker와 비교하여 AP 크기를 확인해보고, AP가 잘 용출되는 buffer의 농도를 추정해본다.

4.Introduction
전기영동(Electrophoresis)은 전기장안에서 하전된 물질이 양극 또는 음극으로 이동하는 현상을 말한다. 물질의 이동하는 속도는 전하량, 크기, 용액의 pH등 여러 가지 요인에 의해 결정된다. 뉴클레오티드, 단백질들과 같이 하전된 물질들을 분리하거나 분석하는데 매우 효과적이고, 소량의 시료를 사용하여 단기간에 시료 혼합물을 분리할 수 있다는 장점이 있다.
단백질의 전기영동에서는 SDS-PAGE 방법이 가장 일반적인 방법으로 이용되고 있다. SDS-PAGE(Sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis)의 원리는 단백질은 구성하는 아미노산에 의해서 (+) 혹은 (-)전하를 띄지만 SDS가 단백질과 결합하게 됨으로써 일시적으로 모든 분자들이 (-)전하를 띠게 한다. SDS는 sodium dodecyl sulfate의 약자로, 구조를 살펴보면 hydrophobic한 부분과 hydrophilic한 부분이 있어서 일종의 detergent이다. 우리가 가진 protein sample을 buffer랑 같이 가열하면 단백질의 4차 구조 folding pattern이 풀리는 denaturation이 일어나고, 이 때 단백질에 노출되는 hydrophobic한 부분에 SDS가 결합하여 단백질은 (-)전하를 갖게 된다. SDS-단백질 복합체가 형성되면 SDS의 sulfate로 인해 단백질 자체의 전하는 거의 무시되고, 강한 (-)전하를 띠게 되는 것이다. 그리하여 gel에 전압을 걸어주면 모든 분자들이 (+)극으로 이동하게 되고, gel의 pore size에 걸리는 전기력의 차이로 인하여 단백질의 size에 따라 각각의 단백질을 분리할 수 있다.

참고 자료

없음