[원핵 생물 실험] prep Plasmid DNA

*승*

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최초 등록일: 2003.10.31
최종 저작일: 2003.10; 4페이지/ 한컴오피스; 가격 1,000원

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◇실험의 목적◇
minipreparation of plasmid DNA는 plasmid DNA를 빠르고 쉽게 분리해 내는 방법인데, Alkali lysis method를 이용하여 순수한 DNA를 분리해 내는 방법을 습득하는 것이 실험의 목적이다.
◇실험방법◇
1) Plasmid가 들어있는 E. coli를 항생제(selective marker)가 들어있는 broth에 접종하여, 37℃에서 incubation한다.
2) Culture broth를 1.5ml tnbe에 담아 centrifugation한다.(cell harvest)
3) 침전물(cell)만 남긴 채 supernatant를 제거한다.
4) 300ul의 P1 solution을 넣고 vortex하여 잘 섞는다.
5) 300ul의 P2 solution을 넣고 4∼5회 천천히 섞어준 후, 5분 동안 ice에 넣어둔다.(※반응시간은 5분이 넘지 않도록 주의한다.).......

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