[실험보고서] 수용성 단백질 정량법

목차

1. Introduction & Abstract
2. Procedure
3. Results
4. Discussion
5. References

본문내용

(2) Bradford Method
단백질에 발색제를 가하여 가시광선 영역의 흡광도를 측정하는 정량법이다. 산성용액에서 Coomassie Brilliant Blue 염료는 단백질과 결합하게 되고, 이로인해 염료의 최대흡광도는
465nm에서 595nm로 이동하게 된다. 595nm에서의 흡광도는 단백질의 농도와 비례하므로 정량이 가능하게 되는데, 이 방법은 발색 반응이 2분이내에 완결되며 1시간까지 안정성이 유지된다.
Broadford 방법의 감도는 Lowry 방법보다 좋으며, 미량 정량법(microassay)을 사용하면 1~20mg의 단백질량을 측정할 수 있다. Bradford 방법은 빠를 뿐만 아니라 비단백질 성분들에 의한 방해도 거의 없다. 몇가지 방해성분이 있으면 결과가 정확하지 않게 되는데, 알려진 방해성분 으로는 Triton X - 100 과 황산도데실나트륨(SDS)가 있다.

참고 자료

(1) 효소 단백질 정제법. 안용근. 양서각. 1994. 63~70쪽
(2) 실험생화학. 한국생화학회. 탐구당. 1986. 230~231쪽, 255~257쪽
(3) Chemistry Principles & Reaction. Masterton & Hurley. Saunders College Pub. 333~337쪽