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동물 세포 배양 & DNA 손상과 마커 확인

빡공열공
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최초 등록일
2019.10.28
최종 저작일
2018.09
22페이지/ MS 워드
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목차

1.Abstract
2.Introduction
3.Material & Method
4.Result
5.Discussion

본문내용

이번 실험은 동물세포 중 cell line인 HaCaT cell을 사용해 이를 무균상태를 유지하여 배양을 하고 이를 anti-cancer chemotherapeutic drug로 사용되는 doxorubicin을 이용해 DNA에 damage를 주었으며 이를 DNA가 손상을 회복하기 위해 생기는 γ-H2AX를 western blot으로 control과 doxorubicin을 처리한 cell의 발현되는 차이를 확인하였다. 그리고 immunocytochemistry를 통해 형광 현미경으로 DNA damage response의 foci를 확인하고 control과 doxorubicin 처리한 cell을 비교하는 실험이었다.

Introduction
동물세포를 배양하는 목적으로는 호르몬, 백신, 효소, 면역 조절인자, 항암제 등의 여러 종류 의료용 치료 단백질을 생산하는 것과 장기나 조직을 만드는 것이다. 간단한 구조를 갖는 단백질은 유전자 재조합 기술을 이용해 미생물에 넣어 생산할 수 있지만, 여러 당그룹이 연결된 복잡한 단백질은 post-translational modification을 할 수 있는 동물세포를 사용하는 것이 바람직하다. 이러한 동물세포를 인위적으로 증식 시키기 위해 세포배양(cell culture)이 필요하며, 동물세포를 배양하기 위해 당류, 아미노산, 비타민, 무기염류 등의 영양분을 함유한 배양배지가 필요하다. 세포배양을 할 때 효소, 화학약품, 물리적인 방법 등을 통해 조직으로부터 분리시킨 뒤에 배양을 하게 된다. 이때 대부분의 세포는 monolayer attachment 상태로 바닥에 붙어 한층으로 자라지만 배양액에 떠다니면서 자라는 suspension cell도 있기에 종류에 따라 다른 방법으로 배양한다. adherent cell은 바닥에 붙어 monolayer으로 자란다.

참고 자료

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Maarten J. Chrispeels and Edited by Paul Gepts, 15 November 2017, Plants, Genes, and Agriculture, Sinauer Associate, p67~78
Banka S, Blom HJ, Walter J, Aziz M, Urquhart J, Clouthier CM, et al. (February 2011). "Identification and characterization of an inborn error of metabolism caused by dihydrofolate reductase deficiency". American Journal of Human Genetics. 88 (2): 216–25.
Froeling FE, Seckl MJ. Gestational trophoblastic tumours: an update for 2014. Curr Oncol Rep. 2014;16(11):408.
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빡공열공
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