Real-time PCR을 처음 접하는 사람이 보면 좋을 자료

목차

1. PCR의 개요
2. Real-Time PCR의 개념
3. Real-Time PCR에 의한 정량분석의 원리
4. 검출방법
5. Primer 설계
6. PCR 기술의 전망

본문내용

TV뉴스나 많은 범죄 다큐멘터리, 그리고 요즘 많은 인기를 누리고 있는 미국 드라마(일명 미드)를 보면 우리의 과학적 사실이 많이 반영되고 있는 다는 것을 알 수가 있는데, 이런 많은 과학적 사실 중에서도 PCR기술 등이 많이 사용되고 있는 것을 알 수가 있다. 예를 들어 한 살인사건에서 범인을 잡아내기 위해 살인 현장에 있던 혈액이나, 머리카락, 그리고 심지어 칫솔의 치석 등을 채취해 그것을 PCR과정을 통해 DNA를 분석 해 냄으로써 범인을 잡거나 하는 것을 우리는 방송 매체 등을 통해서 일상 생활에서 많이 접하고 있고, 친자의 확인이나 유전을 밝히는 데에서 이러한 과학적 방법들이 적용이 되고 있다. 중합 효소 연쇄 반응(Polymerase Chain Reaction, PCR)이라고 일컫는 PCR은 DNA의 원하는 부분을 복제·증폭시키는 분자생물학적인 기술로, DNA가닥의 열변성(denaturation step), primer와의 결합(annealing step), polymerase에 의한 DNA 합성신장(extension step)을 반복하여 실시함으로써 in vitro에서 DNA를 증폭하는 방법을 일컫는다. 이러한 PCR의 과정은 총 4단계로 나뉘게 되는데, 4단계의 과정들을 한 개의 cycle로 하여 여러 cycles을 반복하게 된다.

- PCR의 과정
Step1. : primer, dNTP, 내열성 DNA polymerase를 함유하는 반응액 중에, 목적으로 하는 두 가닥 DNA단편을 열변성 한다. denaturation단계로 적절한 energy에 의해서 double strand가 손상 없이 각각의single strand로 풀어지게 된다.
Step2. : annealing 단계로 각각 풀어진 single strand에 primer가 상보적인 sequense를 찾아서 결합하게 된다.
Step3. : extension로 Taq polymerase가 primer의 3’말단의 free OH기를 시작점으로 해서 단일가닥 template의 상보적인 dNTP를 가져와서 붙여 나가며 사슬 신장을 하게 된다.

참고 자료

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