미생물 유래 기능성 정량 분석: DNS 정량법, Cellulase&Amylase Colorimetrically method, Standard curve

목차

1. Abstract

2. Introduction
1) DNS 환원당 정량법
2) Unit
3) Standard curve
4) 환원당

3. Materials and Methods

4. Results

5. Discussion
1) cellulase 및 amylase 활성 측정 방법 조사
2) 효소 활성 실험에서 각 시약의 역할

6. Conclusion

7. References

본문내용

Abstract
DNS 정량법을 이용해 환원당을 정량하여 cellulase 및 amylase의 활성 평가하였다. Glucose의 환원력이 DNS를 환원시켜 540-575 nm 범위의 빛을 흡수하여 발색한다. 측정한 흡광도와 Standard curve를 통해 시료내의 glucose양을 정량화 하였다. Cellulase의 경우 MBLB1268이 활성을 가졌고 amylase의 경우 또한 MBLB1268이 활성을 가졌다.

Introduction
1) DNS 환원당 정량법
saccharides(당류)에 free carbonyl group (C=O)가 있으면 환원력이 나타난다. 이러한 환원력을 이용하여 발색시약인 3,5-dinitrosalicylic acid (DNS)를 알칼리 조건에서 환원시키면 이 DNS는 3-amino-5-nitrosalicylic acid로 환원되면서 540~575nm 범위의 빛을 흡수하여 된다. 이렇게 발색되는 정도는 시료에 존재하는 환원당과 정량적으로 비례하며 UV-Vis Spectrophotometer를 이용하여 발색되는 정도를 Absorbance로서 측정하여 정량분석을 할 수 있게 되는 것이다.
2) Unit
효소량을 나타내기 위해 규정한 양. 효소활성의 강도, 즉 일정조건에서 일정시간에 효소에 의해 촉매된 반응량으로 나타낸다. 단위시간에서의 반응량을 임의의 단위로 나타내면 되지만, 보통 1분 동안 1μmol의 변화를 하는 효소량을 1단위(1unit, 기호 U 또는 I.U.)로 한다. 또한, 비활성을 단백질 1mg당의 단위수로 나타낸다. 이것은 효소의 순도를 나타내는 지표가 된다. SI국제단위로서 1초당 1mol의 반응을 하는 효소량을 1카탈(katal, 기호 kat)이라고 명명하고, 비활성을 단백질 1kg당의 kat수로 나타내는 것을 제안하고 있다.
3) Standard curve
대표적인 여러 모델에 대하여 모델 변수의 변화에 따라서 모델의 반응을 이론적으로 계산한 곡선이다.

참고 자료

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