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Agar well diffusion assay

후디스
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최초 등록일
2019.01.09
최종 저작일
2017.10
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소개글

ntimicrobial test의 방법 중 하나인 Agar well diffusion assay 방법을 이용하여 항생물질의 항균력을 측정해본다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Results & Discussion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험에서는 Antimicrobial test의 방법 중 하나인 Agar well diffusion assay 방법을 이용하여 항생물질의 항균력을 측정해보는 것이 실험목적이다. 실험방법은 먼저 Log phase의 Indicator bacteria (Lb. plantarum NCDO 955) 배양액을 petri dish에 접종하고(106cfu/plate) MRS agar를 pour plating 해준다. 배지가 굳으면 코르크 보러로 배지를 구멍 내어 멸균된 이쑤시개로 제거해 3개의 well을 만든다. 항균성을 시험할 균주 (P. acidilactici HW 01)를 37℃ 에서 24시간 동안 배양한 MRS broth 10mL를 원심분리 한 후 상등액을 취하여 Membrane filtration 으로 Filtering 한 후 시험에 필요한 양을 나누어 하나는 pH 6.5로 조절하고 하나는 조절하지 않는다. 그 다음 3개의 Well에 각 각 pH 조절 상등액 / pH 미 조절 상등액/ Fresh MRS media를 100ul 넣어준 후 저온에서 흡수시키고 배양하여 well 주변에 Clear zone생성 유무와 크기 등을 비교한다. 우리조의 실험결과, 3개의 well에 생성된 clear zone 평균 지름(cm)은 well 넣어준 물질에 따라 MRS 배지 : 0 / pH 조절 상등액 : 1.87 / pH 미조절 상등액 : 1.93으로 측정되었다. 또한 고찰을 통해 실험 시 주의사항과 clear zone 생성에 영향을 줄 수 있는 요인들에 대해서 살펴보았다.

2. Introduction
(1) Agar well diffusion assay 와 Paper disk assay 실험의 차이 및 이유
① Paper disk assay
일정량의 항생물질이 함유된 종이 disk를 균체를 도말한 고체 배지 위에 놓으면 항생물질이 확산되어 나가면서, 검체균이 감수성인 경우 성장 저지환이 생긴다.

참고 자료

조규성. 식품미생물학 실험. 2012. 문운당, p.164-170.
강인수 외 6명. 식품미생물학. 2000. 훈민사, p.149-152.
정동효. 신편 식품 미생물학. 1999. 선진문화사, p.110-114.
박진용 외 4명. 박테리오신의 특징과 응용. 2006. 신라대학교 자연과학연구소, p.40-57.
[논문] 최정임. Methicillin resistant staphylococcus aureus에 대한 chitosan의 항균성과 항균시험방법에 관한 연구. 2000. 이화여자대학교 대학원, p.137-145.
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