[생명공학실험]Cell Transformation

소개글

Transformation을 통해 E.coli 에 원하는 DNA를 주입한다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 이론 및 원리
1) Competent cell
2) Competent cell 만드는 과정
3) Competent cell 종류
4) Transformation(형질전환)
5) TB buffer 조성

3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항

본문내용

가.Transformation을 통해 E.coli Escherichia coli(대장균)의 약자에 원하는 DNA를 주입한다.

실험 이론 및 원리
E. coli를 포함한 대부분의 박테리아는 일반적인 환경에서 극히 제한된 양의 DNA만을 받아들인다. 이러한 종류를 효과적으로 transformation 하기 위하여 박테리아는 DNA를 받아들이는 능력을 향상시키는 물리적, 화학적 형태의 처리가 필요하다. 정상적인 bacteria cell에 이러한 물리적, 화학적 처리를 하여 외부의 DNA가 잘 들어갈 수 있도록 만든 cell을 competent cell이라고 한다. Competent cell로 만드는 방법으로는 우선 37℃가 아닌 18℃에서 cell을 키우면 세포막을 빽빽하게 못 만들게 된다(heat shock). 그 후에 칼슘이온으로 처리해서 세포막에 구멍을 만든다. 모든 과정 후 위의 상태를 유지하기 위해서 cell을 -70℃에서 보관한다. (상온에 보관하면 살아있는 cell은 원 상태로 세포막을 복구할 수 있다.) 실험을 할 때는 항상 4℃에서 실험을 하도록 한다.

참고 자료

없음