생물레포트8 조직염색법

목차

1. 실험목표
2. 실험원리
3. 실험기구 및 재료
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰(토의)

참고문헌

본문내용

- 실험목표
1) 염색약의 원리를 이해하고, H&E staining의 방법을 알아본다
2) H&E staining으로 염색한 쥐의 기관들을 현미경을 이용해 관찰해 본다.

- 실험원리
• 염색약의 원리 (Hematoxylin, 에오신을 중심으로 )
<표>

루틴염색 : Hematoxylin + 에오신

- Hematoxylin 는 세포의 핵을 염색한다.

hematoxylin 그 자체는 색깔을 내지도 않고 조직에 달라 붙지도 않는다. hematein은 색깔을 내기는 하나 잘 달라 붙지 않는다. 그래서 생각해 낸 것이 hematoxylin을 산화시켜 hematein으로 만든 다음, hematein이 잘 달라 붙게끔 다리 역할을 하는 매염제를 가운데 두고, hematein을 조직에 붙이는 방법이었다. 매염제로는 전통적으로 백반(alum)을 많이 사용하여 왔다. 백반은 양쪽에 어금니를 가지고 있어 한쪽 어금니로는 hematein을 물고 있고 다른 한쪽 어금니로는 조직 내의 산성을 띠는 원자단을 물고 있는 꼴이다. 물고 있는 것처럼 보인다고 해서 매염제를 mordant라고 한다. '물다'를 뜻하는 라틴어 에서 비롯했다. 백반이라는 매염제가 물고 있는 조직 내의 물질은 산성 원자단으로서 인산기, 황산기, 카복실기 등. 이 중 실제 염색액의 pH에서도 산성을 띨 수 있는 원자단은 인산기와 황산기이다.
결국, hematoxylin으로 염색을 한다는 것은 hematein-백반-산성 원자단으로 엮어지는 복합체를 만드는 것. hematein의 색깔은 적갈색이나 이 복합체가 띠는 색깔은 진한 푸른색이다. 복합체의 가운데 끼어 들어간 백반 때문에 색깔이 바뀐다. hematein은 중성 염료이나 백반이라는 매염제를 통해 산성을 띠는 원자단과 결합하므로 편의상 hematein을 염기성 염료를 분류하고 나아가 hematoxylin도 '염기성' 염료로 분류한다.

참고 자료

수업 중 피피티자료
캠벨 생명과학 9판/Jane B. Reece, Lisa A. Urry 바이오사이언스 2012출판
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=426023&cid=42411&categoryId=42411
http://if-blog.tistory.com/5300
레닌저 생화학 / 저자David L. Nelson, Michael M. Cox|역자윤경식, 김호식|월드사이언스|2014.02.20