서강대학교 현대생물학실험3 Plant cell을 사용한 IPCR을 통한 돌연변이 좌 규명과 유전자형 분석

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Material and Method
4. Data and Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

실험에서 사용된 T-DNA는 Ti-plasmid를 지닌 토양세균인 Agrobacterium tumefaciens가 식물에 감염될 때 식물세포로 이행하는 Ti-plasmid의 영역을 의미한다. 양 끝이 25염기쌍으로 이루어진 불완전한 border sequence로 둘러싸여 있다. T-DNA상에는 Agrobacterium에 의해 식물세포의 종양화에 관계하는 cytokine합성 유전자, 옥신합성 유전자, opine합성 유전자등이 존재한다. T-DNA의 식물세포로의 이동은 Ti-plasmid상의 virulence(vir) 유전자군, Agrobacterium의 염색체상의 몇 가지 유전자를 필요로 한다. T-DNA의 식물염색체로의 이입은 식물의 DNA 재조합기구를 이용하여 진행되는 것이며, T-DNA가 특정된 영역을 인식하여 도입되는 경우는 없다. T-DNA의 식물세포로의 전이에 필요한 cis 배열은 말단의 border sequence 뿐이며, T-DNA 내부의 배열은 임의의 배열과 치환이 가능하다.
Agrobacterium tumefaciens는 그람염색음성의 토양세균으로, 식물에 감염하여 근두암종을 유발하는 식물종양균의 일종이다. 종양형성에서는 Ti-plasmid의 존재와 숙주세균의 유전정 성질이 필요한데, 플라스미드의 영역으로는 T-DNA영역과 vir영역이, 세균에서는 염색체상의 chv유전자군(chromosomal vir gene)등의 복수의 영역을 필요로 한다. 종양화는 T-DNA가 식물염색체로 전위하여 안정하게 이입됨에 따라 발생한다. Vir나 촢는 세균과 식물세포의 접착이나 T-DNA의 전위에 관여하는데, 현재 이 세균은 쌍자엽식물로의 유전자 도입을 위한 plasmid vector의 숙주로 이용하고 있다. 이 속에는 모근병을 유발하는 Agrobacterium rizogens, 병을 일으키지 않는 Agrobacterium radiobacter가 알려져 있는데, 이는 세균의 성질로 분류한 것이 아니라, plasmid의 속성에 의해 분류한 것이다. Agrobacterium tumefaciens는 현재까지 자연계에서 존재하는 가장 효율적인 plant genetic engineer로 알려져 있다.

참고 자료

Michiei Oto, Satoshi Miyake and Yasuhito Yuasa (1993). "Optimization of Nonradioisotopic Single Strand Conformation Polymorphism Analysis with a Conventional Minislab Gel Electrophoresis Apparatus". Analytical Biochemistry. 213 (1): 19–22
Hamilton CM, Lee H, Li PL, et al. (March 2000). "TraG from RP4 and TraG and VirD4 from Ti plasmids confer relaxosome specificity to the conjugal transfer system of pTiC58". J. Bacteriol. 182 (6): 1541–8
Geoffrey M. Cooper (2013), The Cell, p492
Moore, LW; Chilton, WS; Canfield, ML. (1997). "Diversity of Opines and Opine-Catabolizing Bacteria Isolated from Naturally Occurring Crown Gall Tumors". Appl. Environ. Microbiol. 63: 201–207.
James D. Watson (2014), Molecular biology of the cell, p102-3