서강대학교 현대생물학실험2 TA Cloning Transformation

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Material and Method
4. Data and Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

이번 실험을 진행하며 이전 실험에서 제조한 PCR product를 본 실험에서 사용하려 하는 vector에 삽입하는 DNA cloning을 하였다. DNA Cloning은 실험에서 목표로 하는 특정한 유전자 또는 DNA단편을 이들을 포함하는 Size가 더 큰 염색체에서 분리하고 이들을 저분자의 DNA 운반체에 접합시킨 다음 이 변형된 DNA를 몇천~몇백만 배로 복제하여 증폭시키는 것을 말한다. 이 과정을 거치면 특정 유전자와 DNA단편을 선택적으로 증폭할 수 있다. 이번 실험에서 이 과정을 거치기 위해 사용하는 DNA Cloning method는 TA cloning으로, 아데닌(A)염기와 티민(T)염기의 상보적 결합형성을 이용한다. 대부분의 경우 Taq DNA polymerase를 통하여 PCR product가 증폭되는데, Taq polymerase는 product의 3’ 말단에 아데닌(A)염기를 붙인다. Taq DNA polymerase를 거친 PCR product들은 아데닌(A)염기에 상보적인 염기인 3’ 티민(T) 돌출부를 가진 벡터에 cloning된다.

참고 자료

Geofrrey M. Cooper, Robert E. Hausman(2013), The cell, 6th ed. SINAEUR, p. 31~32
Campbell Reece Simon(2008), Essential biology, 2nd ed, Pearson Benjamin Cummings, p60
Daniel L. Hartl(2014), Essential Genetics, 6th ed, Jones & Bartlett Learning, p245