Western blotting

목차

1. Western blotting 목적
2. Western blotting 시약 및 장비
3. Western blotting 원리
4. Western blotting protocol

본문내용

* Western blotting (단백질 흡입법)
- 단백질을 크기 별로 분리하는 기술. 항원-항체 반응을 이용하여 전체 단백질에서 특정 단백질 만을 Detection 할 수 있다.
- sample(Total protein)을 SDS-PAGE를 이용해 분리하고, 이 단백질을 membrane에 옮기는 과정을 거쳐 항원-항체 반응을 시켜 발광을 유도함으로써 검출한다.

* Western blotting 목적
- 전기영동으로 분리한 단백질을 소수성 막에 고정하고 특이적 항체를 사용하는 목적으로 단백질을 검출하는 방법.

* Western blotting 시약 및 장비
① Sample preperation
- Lysis buffer, 단백질 정량 standard, 단백질 정량을 위한 Dye, 4X loading Dye,
② Gel preparation
- D.W, 30% acrylamide mix, 1.5M Tris (pH 8.8), 1M Tris-HCl (pH 6.8), SDS(10%), ammonium persulfate (10%), TEMED

참고 자료

없음