미생물학 실험 E. coli Transformation 레포트

목차

1. Title
2. Purpose
3. Principle
4. Materials
5. Method
6. Result
7. Discussion
8. Referernces

본문내용

Purpose
E. coli의 transformation을 통해서 유전공학에 많이 쓰이는 transformation의 기작을 이해하고, 그 방법을 익힌다.

Principle
Transformation
형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 일을 말하며, 수용세포에 노출된 DNA가 흡수, 통합, 발현되는 과정으로 몇몇의 박테리아 사이에서 자연적으로 일어나는 현상이다.
유전자 클로닝의 목적
-소량의 DNA로부터 많은 양의 DNA를 얻어 유전자 구조와 발현의 연구를 위해 필요한 대량의 DNA 제공하기 위해
-특정 유전자의 산물만을 순수하게 대량으로 얻기 위해
-정제와 유사하게 특정유전자를 가진 재조합체를 선별 가능

Transformation 의 방법
Chemical method
- Calcium phosphate를 이용한 방법
- Liposome을 이용한 방법
Physical method
- Electroporation
- Microinjection
Virus를 이용한 방법
- Retrovirus
- Adeno or adenoassociate virus
ㄷ. Transformation은 에너지가 소요되는 생명 활동으로, 수용 능력이 있는 세포 (competent cell)에서만 일어난다.
ㄹ. 세균의 증식 단계 중에 Transformation이 가장 활발히 일어나는 시기는 분열, 즉 생장이 가장 활발한 시기 즉 대수기 (log phase) 이다.

Competent cell
DNA를 받아들일 수 있는 능력을 가진 cell을 말하며, 화학처리에 쓰이는 시약은 Calcium Chloride, Manganase Chloride, Hexamminecobalt Chloride, Dimethyl Sulfoxide (DMSO)등의 여러 가지가 있는데, 이 중 가장 중요한 것은 calcium chloride이다.

참고 자료

[네이버 지식백과] 유전공학 [genetic engineering, 遺傳工學] (생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 도서출판 여초)
[네이버 지식백과] 재조합DNA기술 [recombinant DNA technology, 再組合~技術] (생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 도서출판 여초)
[다음 백과사전] 제한효소 [restriction endonuclease, 制限酵素]
[엘피스 바이오텍] CUT-PROOFRestriction Enzymes
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=331990&cid=2908&categoryId=2908
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위키백과 ‘형질전환’ http://ko.wikipedia.org/wiki/%ED%98%95%EC%A7%88%EC%A0%84%ED%99%98
위키피디아 ‘transformation’ http://en.wikipedia.org/wiki/Transformation