[실험프로토콜] RNA extraction

소개글

RNA Extraction Protocol By Thomas Whisenant 입니다.
Cell에서 처음 RNA를 뽑는 분들이 보시면 편하게 따라할 수 있을 것입니다.

목차

1. Materials
2. Method
3. Using materials (machine & accessory)

본문내용

Method
Phase Separation
1. cell (in 6-well plate) Trizol 300㎕을 넣고 scraper로 긁어 모음.
2. chloroform 60㎕를 넣고 vortex 15sec, RT에서 2-3min 놓아둠.
3. centrifuge 12,000xg 15min, 2-8 ℃

RNA Precipitation
4. centrifuge 후 aqueous phase (물 층)만 조심히 따서 새 e-tube에 옮김.
5. Isopropanol 150㎕ 넣고 inverting한 후 RT에서 10min incubate. - Isopropanol 부터는 ice에서 진행하라는 말이 있는데 여기 방법에서는 RT에서 진행해도 된다고 함.
6. centrifuge 12,000xg, 10min, 2-8 ℃
RNA Wash and Resuspension
7. centrifuge 후 상층 액을 버리고 pellet만 남김.

참고 자료

없음