PCR RAPD analysis

*영*

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Ⅰ. Materials
r taq, 10X PCR buffer, 2.5mM dNTP mix, UBC primer(up&down), plant genomic DNA, D.W., PCR machine(MyCycler), pipette, 200ul PCR tube, tip, latex gloves, etc.

Ⅱ. Methods
1. 1주차 실험 때 추출하였던 plant genomic RNA를 약 2ng이 되도록 D.W.에 희석해준다.
2. 200ul PCR tube에 DNA 1ul, 2.5mM dNTP mixture 2ul, UBC random primer 2ul, 10X PCR buffer 2ul, r taq polymerase 0.2ul를 넣은 후, 총 20ul가 되도록 D.W.를 채워준 후 잘 tapping하여 내용물을 섞어준다.
3. mini spin을 이용하여 내용물을 튜브 바닥으로 깔끔하게 모아준 후, PCR 기계를 setting한다.

참고 자료

남상욱 외 2인, 유전공학의 이해 제 2판, p40~41, p52
이병무, 유전자 클로닝과 DNA분석, 월드사이언스, p147~160
http://partrita.blogspot.kr/2013/05/pcrpolymerase-chain-reaction.html
http://www.elpisbio.com/data/News%20letter/News%20letter%203.pdf

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