생화학 실험 맥아 추출물 속 탈인산가수분해 효소의 활성 측정

목차

1. 서 론

2. 실험
2.1. 맥아 탈인산 가수분해 효소 분리
2.2. 맥아 추출물 단백질 정량
2.3. 탈 인산 가수분해 효소 활성 측정

3. 결과
3.1. 맥아 추출물 흡광도 측정 후 실측정치 계산
3.2. 생성된 PNP의 농도 계산
3.3. 탈인산가수분해 효소의 활성도 계산
3.4. 효소의 비활성 계산

4. 결론 및 고찰

참고문헌

본문내용

1. 서 론
탈인산가수분해 효소란 모든 생물에 존재하는 큰 무리의 효소로서 한 화합물에서 다른 화합물로 인산기를 전이시켜 인산유기에스테르의 가수분해와 합성을 촉매하는 작용을 하는 효소이다. 맥아에는 이 탈인산가수분해 효소가 있는데 이 실험에서는 맥아의 탈인산가수분해 효소의 활성을 측정할 것이다. 또한 단백질 정량 과정에서는 bradford법을 통해 정량함으로써 bradford법의 원리를 이해하고 익힌다.

2. 실험
2.1 맥아 탈인산 가수분해 효소 분리
맥아 25g을 4℃의 증류수 30ml에 잘 현탁 하여 저어주며 30분 동안 방치하고 시간이 다 되면 무명망사 두 겹으로 맥아 현탁액을 거른다. 거른 맥아 추출액을 마이크로 튜브에 1.5ml씩 분획한 후 4℃ 100,000xg로 5분간 원심분리한다.
상층액을 새 tube로 옮기고 단백질과 효소 활동도 측정을 위해 냉동 보관한다.

참고 자료

부성희, 조만호, 이상원, 김기영, <생화학실험> ,청문각, 2015, pp. 118-130, pp. 169-174