[분자세포생물학] Elution of DNA

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Ⅱ. Material
0.5×TBE buffer, chloroform, phenol, 3M sodium acetate(pH 4.8)

Ⅲ. Method
1. 원하는 DNA 전기영동
2, DNA gel 조각을 칼로 자른 후 eppendorf tube에 넣는다.
3. -20oC, 15min 방치
4. 37-60oC, 10min 방치
5. gel 조각을 tip으로 간 후, 0.5×TBE buffer 500ul 넣는다.
6. 500ul phenol을 넣고 1min 이상 voltexing
7. 12,000rpm, 5min(at 4oC) 원심분리.
8. fresh tube에 상층액을 취한다.
9. 500ul chloroform넣고 1min이상 mixing
10. 12,000rpm, 5min(at 4oC) 원심분리
11. fresh tube에 상층액을 취한다.
12. 1/10 volume 3M sodium cetate(pH4.8)과 2×volume의 100% EtOH 첨가
13. -70oC에서 15min방치
14. 12,000rpm, 10min(at 4oC) 원심분리

참고 자료

강종백, 유전자 클로닝 입문, 월드사이언스, 1998,
KIST 생명공학연구소, 분자생물학노트, 한림원, 1998,
이동환, 유전공학, 운문당, 1991,

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