PCR (Polymerase Chain Reaction) (주형 DNA,Primer,dNTP,Tris-Hcl,전기영동)

*진*

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PCR 실험시 발표한 자료입니다.

본문내용

Primer
PCR의 가장 중요한 요소, 정확도 결정
조건 : 주형 사슬에 상보적
- Primer의 3’end가 주형사슬과 마주보는 방향으로 위치
길이 : PCR의 효율과 관련 17~30mer 정도가 적당

<중 략>

PCR의 과정
주형 DNA 변성 (Denaturation)
DNA Primer 결합 (Annealing)
상보 DNA 합성 (Extention)
새로운 이중가닥 DNA 변성
PCR 반응 반복
PCR 산물 확인 및 정제

<중 략>

PCR 과정의 온도
변성 온도 : 94℃
- 보통 90 ~ 96℃에서 30~60초
(첫 cycle의 변성은 확실한 변성을 위해 약 5분간 진행)
프라이머 결합온도 : 40 ~ 65℃
- 보통 40 ~ 65℃에서 30~60초
합성 온도 : 70 ~ 74℃
- 때에 따라 시간을 연장시키는 것이 좋다.
(PCR산물의 크기가 크거나 반응요소의 농도가 낮을때)

참고 자료

없음

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