세포2 실험자료

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본문내용

DNA는 세포가 살아가는데 있어서 가장 중요한 유일의 분자이며, 세포의 생존과 증식에 필요한 모든 정보를 담고 있다. 염색체를 이루는 DNA는 단백질 암호화 기능이 있는 유전자뿐만 아니라 여러 가지 성분으로 구성되어 있다. 대부분의 기능이 있는 유전자는 한 염색체의 특정한 자리에 있다. 근육 단백질의 DNA 염기서열을 인식하는 Probe를 이용하였을 때 한 염색체에만 Probe가 붙는다. DNA를 조각낸 후 두 줄을 떨어지게 한 후에 다시 만날 수 있게 하면 어느 부분들은 아주 빠른 속도로 이중나선 구조를 회복한다. 이것은 반복적인 염기서열을 갖는 부분들이 있기 때문이다. 물론 액틴 유전자는 5~10개, 케라틴은 20개, 미오신은 5~10개, 글로빈은 5개 등으로 기능이 있는 유전자도 비슷한 염기서열로 조금조금 다른 그룹이 있을 수 있다. 즉 베타 글로빈뿐만 아니라 델타글로빈 등 유전자 그룹이 가능하기 때문이다.

<중 략>

이번 실험은 식물의 DNA를 추출해내는 것이었다.
식물로는 양배추가 사용되었으며, 잘게 빻기 위하여 양배추를 영하 70도에 보관하였다. 양배추를 갈기 위한 사발도 같이 얼려서 잘게 갈 때 양배추가 녹는 것을 방지하였다. 이렇게 양배추를 얼리는 가장 중요한 이유는 DNA를 뽑아내기 위해서는 식물 세포벽을 부수는 것이 필수적인데, 얼렸을 경우 세포벽이 절단나서 안에 들어 있는 DNA를 추출할 수 있기 때문이다.
그러고 나서 균질화를 시킨 후 CTAB buffer를 첨가하고 Voltexing해준다. CTAB(Cetyltrimethylammonium Bromide)은 핵산과 결합하여 nucleic acid-CTAB복합체를 만들게 된다. 이 다음 RNase를 넣어서 들어 있는 RNA를 분해시키고, 65℃에서 5분간 incubation한다. 이 때 ℃에서 5분간 i, 6565℃에서 incubation하는 이유는 ℃에서 5 i, 이전의 buffer의 활성을 가장 활발하게 이루어지는 온도의 범위이기 때문65buffer의 역할을 확실하게 하도록 하기 위함이다.

참고 자료

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압축파일 내 파일목록

Exp 10. PCR-Southern hybridization.hwp
Exp 1~2. Isolation of genomic DNA.hwp
Exp 3. Isolation of plasmid DNA.hwp
Exp 4. Electrophoresis of DNA.hwp
Exp 5. Digestion of DNA.hwp
Exp 7. Polymerase chain reaction (PCR).hwp
Exp 8. Elution of DNA.hwp
Exp 9. Synthesis of DNA probe.hwp