DNA 제한효소 분리 동정
- 최초 등록일
- 2015.05.01
- 최종 저작일
- 2015.04
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목차
1. 실험방법
2. 실험결과
3. 고찰
본문내용
1. 실험방법
1) 2개의 Micro tube를 준비한다.
2) 1번 Micro tube에는 Lambda DNA 5ul 와 증류수 15ul를 넣어준다.
3) 2번 Micro tube에는 Lambda DNA 5ul, Eco R1 1ul, 10x Eco R1 buffer R 2ul, 증류수 12ul를 넣어준다.
3) 1번과 2번 solution을 incubator 37℃에서 1시간정도 반응시켜준다.
4) 50x TAE buffer를 1x TAE buffer 1L가 되도록 dilution 한다.
5) 1x TAE buffer 50ml에 Agarose 질량이 1%가 되도록 넣어준다
6) 상온에서 만졌을 때 손이 따뜻한 정도보다 조금 뜨거운 정도가 됐을 때 Red safe를 전체의 1/20000이 되도록 넣는다.
7) Red safe를 넣은 agarose gel을 large tray가 꽂혀있는 gel box에 부은 후, 넓은 comb 방향으로 꽂고 굳을 때 까지 기다린다.
참고 자료
Roberts RJ , "Restriction and modification enzymes and their recognition sequences", Nucleic Acids Res. 8 , January 1980, pp 63–80.
한양대학교 분자생명과학부 저, “일반생물학실험(제2판)”, 한양대학교 출판부, 2010, p. 53
엄용빈 외 4인 공저, ‘임상 분자생물학’, 고려의학, 2005, pp. 156~163