[세포생물] 배양세포의 면역화학염색과 항원 항체

목차

배양세포의 면역화학염색
1. 배양세포의 면역화학염색
2. 슬라이드 준비
#유리를 닦는 방법
#접착제 코팅하기
3.세포의 준비
1)부착세포의 처리
2)부유세포의 처리
#세포도말
#cytocentrifuge방법
#cell block 염색
#Encapsulated agarose microbeads
4.고정
#Specific antigens
#4% formaldehyde 제작 방법
5.세포의 자가형광
6.봉입
#전형적인 염색방법을 나열하면 다음과 같다
7.DNA replication
#Bromodeoxyuridine 표지법
8.면역화학염색의 기본적 사항
1) 항체
항체의 결합력
항체의 안정성
항체의 반응속도
항체의 보관
항체의 희석
항체의 반응시간
항체의 반응온도
2)효소
Horseradish peroxidase
Calf intestine alkaline phosphatase
Substrate and chromogen
DAB
AEC
3)염색방법
Direct method
Two-step indirect method
Three step indirect method
Soluble immune complex method
Avidin-biotin 방법
4)염색의 정도 관리
일차항체의 대치
조직
5) 배경염색
Hydrophobic interaction
이온결합
Endogenous 효소 활성
자연항체 및 불순 항체
Endogenous avidin binding activity
항원의 확산
교차 반응
Fc 수용체
기타
6) 항원 복구

본문내용

1. 배양세포의 면역화학염색
배양 세포의 면역화학 염색은 일반적인 조직의 면역화학 염색과 유사한 점이 많지만, 다르게 처리해야 하는 부분이 있다. 배양 세포의 면역화학 염색에 전형적으로 사용하는 방법은 다음과 같다.
1) 고정 (fixation)
2) 투과화 (permeabilization)
3) 비특이적 반응의 차단
4) 항체를 이용한 염색
5) 봉입후 관찰

2. 슬라이드의준비
배양에 사용할 슬라이드는 완벽하게 깨끗해야 한다. pre-cleaned slide라고 시판되는 것도 유리 표면에 기름 성분이 뭍어 있어 세포 배

참고 자료

없음