플라스미드 DNA 와 genomic DNA

목차

1.Plasmid DNA Part
2. Genomic DNA Part

본문내용

1.Plasmid DNA Part
<Day-1>
Day-1의 실험은 plasmid를 bacteria에 transformation하는 것이 그 내용이다. 아래 procedure에 따라 박테리아에 Ca2+ shock과 heat shock을 줘서 plasmid를 주입한다. 이 bacteria들을 3개의 plate에 나눠서 배양하게 되는데 각각 그 환경이 다르다. 각각의 bacteria를 분리하기 위한 과정이라 할 수 있다. 첫 번째 plate는 LB만, 두 번째 plate는 LB+Amp, 세 번째 plate는 LB + Amp + X-gal +ITPG를 사용한다.
첫 번째 LB만 넣은 것은 다른 plate와 비교하기 위한 일종의 대조군이다. tube에 있던 bacteria들이 제한없이 모두 자란다.
두 번째 plate와 세 번째 plate에는 Amp를 넣는다. 모든 bacteria에 transformaition이 성공하는 것은 아니므로, plasmid의 selection marker인 amp resistance gene을 이용하여 구별해내기 위해서이다. selection marker란 plasmid transformaion이 제대로 되었는 지 확인하기 위한 gene으로 우리가 이용하는 plasmid에 꼭 필요한 세 가지 구성 요소 중 하나이다.

참고 자료

없음