[생화학] NMR을 위한 단백질 정제

소개글

3달간 실제 수행한 단백질 정제과정
PAGE, trainsformaiton, cell culture , ion-exchange 및 ge-filtraiotn 등의 과정및 결과 사진 첨부 결과 분석등
실험 보고서의 예가 되것같습니다.

목차

Introduction
Material and Methods
Result
discussion

본문내용

Step 1. Ammonium sulfate Precipitation
Ammonium sulfate Precipitation Buffer:Kpi(pH 7.6), 1mM EDTA, 5mM BME
Result: 45% 농도의 pellet 에 존재 (45% SUP 에도 존재 할 수 있으므로 이것도 동일하게 step. 5 까지 거치면 더 많은 양을 획득활수 있다.)

Step 2. Dialysis (1/100*100 scale)
Buffer : 20 mM Tris pH7.5, 100mM NaCl, EDTA 1mM, DTT lmM
Dialysis Bag(membrane): 3.5 Kd의 pore size

Step 3. SP separose column
Buffer A: 20 mM Tris pH7.5, 100mM NaCl, EDTA 1mM, DTT lmM
Buffer B:A + 0.5 M NaCl
Result: SP unbound에 sample존재

그림 (3)-1 을 보게 되면, precipitaion의 pellet과 sup 에 대한 각각의 ionexchane column working 의 결과를 보여주게 되는 데, Sda는 그 크기 5 Kd 이므로 보통의 일반적 PAGE로 정확이 구분 할수 있는 한계 값에 가깝다. 즉, 끌림 현상으로 그 존재의 파악이 힘든데, 위 산지에서는.......

참고 자료

없음