elution buffer 만들기

목차

1. Subject
2. Object
3. 실험도구
4. Introduction
5. Method
6. Result
7. Discussion
8. References

본문내용

□ Subject
단백질 분리정제 및 기능분석 첫번째 시간
Column chromatography의 준비로서의 buffer만들기

□ Object
1M의 Tris-HCl (pH7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만든다.

□ 실험도구
pH 미터기, spinbar, stirier, Tris 가루, HCl, 증류수, pipette (1ml), 메스실린더, 비커,
전자저울, 비닐장갑, 기름종이, 50ml튜브

□ Introoductio

○ Buffer solution
▹ Buffer solutions는 적은 양의 산이나 염기를 첨가하거나 희석시킬 경우, 용액의 H+와 OH-의 농도 변화를 줄이기 위해 사용하는 용액으로 완충용액 이라고도 한다. Buffer solutions는 약산과 그것의 짝염기(conjugate base)로 이루어진 것이 일반적이고 약염기와 그것의 짝산으로 이루어진 경우는 약산과 그 짝염기로 이루어진 것 보다 적다. 용액의 pH변화에 저항하는 buffer solutions의 기능은 앞서 말한 약산과 그 짝염기의 평형에 의한 결과로, Le Chatelier의 공통이온효과에 의해 설명될 수 있다.

HA(aq) + H2O(l)→ H3O+(aq)+A−(aq)

위의 용액에 염기를 넣게 되면, 염기는 곧 산-염기 중화반응을 통해 H3O+를 제거하고, 평형반응에 의해 위의 반응은 정반응이 진행되어 원래의 pH를 유지하게 된다. 마찬가지로, 위 용액에 강산을 첨가하면, 짝염기 A−와 protonated 되어 역반응이 진행되므로 원래의 pH가 유지될 수 있다. 이러한 현상은 강산이나 강염기의 용액에 산 또는 염기를 떨어뜨렸을 때와 큰 차이를 보이는데, 이는 강산에 강염기를 이용해 titration 할 때보다 약산과 약염기를 titration할 때 pKa값 근처에서의 pH 변화가 작은 현상과 비슷하다.

참고 자료

중성용액 만들기에 관한 실험 방법 개선 연구 / 최문희, 2006
http://en.wikipedia.org/wiki/Buffer_solution
http://www.chembuddy.com/?left=pH-calculation&right=pH-meter
http://en.wikipedia.org/wiki/Denaturation_(biochemistry)
http://en.wikipedia.org/wiki/Ion-exchange_chromatography