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PROCESS DESIGN for Gloshedobin

*지*
최초 등록일
2014.03.26
최종 저작일
2010.06
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소개글

단백질 생산 공정을 SuperPro Designer를 통해 설계하고, 여러가지 대안을 바탕으로 공정 경제성 향상을 모색함.

목차

I. 서론
1. Introduction
1.1. About Gloshedobin
1.2. Refolding
2. The route of process
3. Basic information
3.1. Simulation을 위한 기본조건
3.2. Raw materials
3.3. Product Price

II. 본론
1. 공통 ROUTE
1.1. Fermentation
1.2. Centrifugation (Removal of Contaminating Proteins)
2. ROUTE 1
2.1. Abstract
2.2. Homogenization
2.3. Centrifugation (Removal of Contaminants)
2.4. IMAC-PBA Chromatography
2.5. Gel Chromatography
2.6. Dryer
2.7. 공정 비교
2.8. Result
2.9. Economic Analysis
3. ROUTE 2
3.1. Overall process
3.2. Detail process
3.3. Scheduling
3.4. Economic evaluation
4. ROUTE 3
4.1. Overall Process - Column Refolding
4.2. Cell Disrupt
4.3. IB Solubilization
4.4. Purification & Refolding
4.5. Final Purification
4.6. 경제성 평가
4.7. Overall Process - Dilution Refolding
4.8. Purification
4.9. Refolding
4.10. Final Purification
4.11. 경제성
4.12. Column Refolding vs Dilution Refolding

III. 결론
1. product 비교
2. Raw Material
3. Annual operating time
4. Executive summary
5. Annual Operating Cost
6. Equipment 비교
7. 종합적 의견

IV. REFERENCE

본문내용

파충류에서 피의 응고를 막는(항응고) 효소를 추출하는 연구를 시작한 이래로 TLEs중 40개 이상이 분리되고 특성화 됐다. 특히 뱀독에서 추출한 Thrombim-like enzymes (TLEs)은 serine proteases로 hemostasis과 thrombosis에 영향을 미친다.
뱀독의 TLEs는 fibrinigen을 fibrin으로 바꾸는 능력을 가지고 있는데 이 fibrin은 cross- linked 되어 있지 않아 쉽게 fibrinolytic 과정을 통해 분해된다. 그리고 뱀독의 TLEs는 항응고 작용을 통해 혈액응고 장애를 치료할 수 있는 가능성을 지니고 있다.
Gloshedobin은 Gloydius shedaoensis의 독에서 추출해 낸 TLE중 하나로 다른 뱀독과 마찬가지로 항응고 작용을 한다.
이 gloshedobin을 혈액응고 장애 치료에 사용할 수 있으면 좋겠지만 얻을 수 있는 뱀독의 양이 한정적일 뿐 아니라, 분리와 정제 또한 어렵기 때문에 연구나 치료를 위한 충분한 양의 gloshedobin을 얻기가 힘들다. 따라서 gloshedobin을 자연적으로 얻는 것의 대안으로 유전공학을 이용한 gloshedobin의 제조방법에 대한 연구가 이루어지고 있다.
우리는 이번 project를 통해, gloshedobin을 정제하는 design process를 설정하고 그에 따른 경제성분석을 통해 효과적인 공정 system을 디자인해 보고자한다.

1.1.1. About Gloshedobin

Gloshedobin은 Gloydius shedaoensis(뱀의 한 종류)의 독에서 추출한 Thrombim-like enzymes으로 혈액 응고를 막는 성질을 지니고 있다.
Escherichia coli 는 재조합 단백질을 제조하는데 빠르고 경제적인 루트를 제공하기 때문에 cell내에서 단백질의 과도한 발현을 유도해 고체 응집체인 Inclusion bodies(IBs)를 생성함에도 불구하고 재조합 단백질을 만드는데 자주 사용된다(한편 IBs는 unfolded protein의 응집체이다).

참고 자료

Rui Nian, Lihan Tan, WooSeok Choe, Effective reduction of truncated expression of gloshedobin in Escherichia coli using molecular chaperone ClpB, Chemical Engineering Science 63 (200 28752880
Rui Nian, Lihan Tan, WooSeok Choe, Chaperoneassisted column refolding of gloshedobin with the use of refolding cocktail, Journal of Chromatography A, 1214 (200 47 58
G. H. Lee, D. Cooney, A. P. J. Middelberg, W. S. Choe, The economics of inclusion body processing, Bioprocess Biosyst Eng 29 (200 73 90
Rui Nian, Lihan Tan, WooSeok Choe, Foldinglikerefolding of heatdenatured MDH using unpurified ClpB and DnaKJE, Biochemical Engineering Journal 40 (200 3543
Robert M. Kennedy, ExpandedBed Adsorption Chromatography, Current Protocols in Protein Science (200 8.8.18.8.25
Lars Hagel, GelFiltration Chromatography, Current Protocols in Protein Science (19 8.3.18.3.30
Yan Peng Tan, Tau Chuan Ling, Khatijah Yusoff, Wen Siang Tan, Beng Ti Tey, Comparative Evaluation of Three Purification Methods for the Nucleocapsid Protein of Newcastle Disease Virus from Escherichia coli Homogenates, The Journal of Microbiology Vol. 43 No. 3 June (200 295300
D. R. Curbelo, G. Garke, R. C. Guilarte, F. B. Anspach, W. D. Deckwer, Cost Comparison of Protein Capture from Cultivation Broths by Expanded and Packed Bed Adsorption, Eng. Life Sci. 3, 10 (200 406415
SURINDER MOHAN SINGH, AMULYA KUMAR PANDA, Solubilization and Refolding of Bacterial Inclusion Body Proteins, JOURNAL OF BIOSCIENCE AND BIOENGINEERING, Vol. 99, No. 4 (200 303 310
RAINER RUDOLPH, HAUKE LILIE, In vitro folding of inclusion body proteins, The FASEB Journal Vol. 10 January (19 4956
www.sigmaaldrich.com
http://www.kiwtma.co.kr
www.wikipedia.org
http://hanidainfo.blogspot.com/2008/08/recoveryofuraniumbymicrofiltration.html
*지*
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