소개글
[단국대 생물학 실험 보고서 A+] 8.DNA 추출 및 전기영동
서울대학교 재학생이 학점은행제로 단국대학교 생물학 실험을 수강하면서 작성한 실험보고서 입니다.
보고서에서 가장 중요한 discussion이 매우 충실하며,
실험 개요, 실험 방법, 참고문헌 등을 포함한 보고서 내용이 깔끔하고 고급스러울 뿐만 아니라
표지까지 직접 디자인하여 조교님께 압도적인 인상을 남길 수 있었습니다.
목차
1. 목적
2. 개요
3. 재료
4. 방법
5. 결과
6. 고찰
7. 참고문헌
본문내용
방법
1. DNA 추출
1) 면봉으로 입안을 긁어 구강상피세포를 채취한다.
2) 면봉 끝의 솜부분을 잘라 튜브에 넣고 PBS 400μl, Protease solution 20μl, buffer ATL 400μl를 첨가하여 15초 vortexing 한다.
3) 56℃에서 10분 incubating 한다.
4) 100% EtOH 400μl를 첨가하여 vortexing 한다.
5) 위 용액 중 700μl를 column으로 옮긴 후 8,000rpm으로 1분 동안 원심분리한다.
6) Collection tube에 모아진 용액은 버리고, 새로운 tube를 끼워 4번 단계에서 남은 용액으로 5번 단계를 반복한다.
<중 략>
고찰
구강상피세포에서 추출한 genomic DNA, PCR product 1,2,3, 대조군으로 negative control 시료, 그리고 DNA 사이즈 측정을 위한 ladder를 아가로스 젤에 분주하여 전기영동을 하였다. 실험에 사용된 ladder는 10kb+ DNA ladder로서, 측정 가능한 band 범위가 0.25 ~ 10kbp 이다. 이것은 우리가 사용한 아가로스의 농도에 따른 DNA 분리 범위와도 상응한다. 보통 0.9% 농도의 아가로스 젤이 0.5 ~ 7kbp의 분리 범위를 요하는 실험에 사용되는데6, 우리 실험에서는 1% 농도의 아가로스 젤을 사용하였으므로 젤의 DNA 분리 범위가 ladder의 측정 범위와 대략 상응하는 것이다.
참고 자료
일반생물학 실험교재 편찬위원회, 『일반생물학실험』, 여명사, 2010, pp.46-50.
James D. Watson, 『왓슨 분자생물학』, 양재섭 외 역, 바이오사이언스, 2010, pp.126, 741.
칸노 순부, 『전기영동 최신 프로토콜』, 강호일 역, 월드사이언스, 2006, p.33.
T.A. Brown, 『유전자 클로닝과 DNA분석』, 이병무 외 역, 월드사이언스, 2008, p.6.
Neil A. Campbell, 『생명과학』, 전상학 외 역, 바이오사이언스, 2008, p.405.
Yacsi, 「DNA분리와 전기영동실험」, http://blog.daum.net/yacsi2/5890634, 2010년 1월 6일, 아가로스 농도 별 DNA 분리범위 참조.