3. Gram Staining Differential Staining

목차

1. Introduction
2. Materials & Methods
3. Result
4. Discussions

본문내용

미생물을 관찰하기 위해 염색하는 방법 중 그람염색 방법에 대해 알고 그람염색방법을 이용해 균주를 구별한다.

실험원리
미생물의 관찰에는 살아있는 미생물 그 자체를 관찰하는 방법과 염료처리를 하여 관찰하는 방법이 있다. 이 중 염색하여 관찰하는 방법을 많이 사용하는데 그 이유는 대개의 박테리아는 색을 띠지 않고, 세포의 대부분은 물로 이루어져 있어서 물과 비슷한 밀도를 가지므로 광학현미경에서는 투명하게 나타나서 관찰하기 어렵기 때문이다. 따라서 박테리아를 관찰하기 위해 여러 종류의 염색시약(dye)을 이용한 염색법이 개발됐다. 여러 염색법으로, 미생물과 배경간에 대비차(contrast)를 증가시켜 미생물을 보다 명확히 볼 수 있다.

단일염색(simple staining)은 모든 세포와 조직의 유형에 관계없이 동일한 색상으로 염색되는 방법이다. 단일염색은 양성염색(positive staining)과 음성염색(negative staining)으로 나누어진다. 양성염색에서 세포를 염색하기 위하여 염기성 염료가 사용되며, 대비차를 증가시켜 현미경으로 더 쉽게 볼 수 있게 한다. 염료는 유기화합물로 이들은 특이한 세포물질과 친화력을 갖고 있다. 즉 염기성 염료는 양전하를 띠고 있는 발색단(chromophore ; frome Greek chroma, meaning color)를 갖고 있어서 핵산, 산성 다당류 같은 음전하로 하전된 세포성분과 강하게 결합한다. 양이온 염료의 예는 methylene blue, crystal violet, safranin 등이 있다. 음성염색에서 세포는 염색되지 않고, 배경이 염색되어 세포의 형태를 관찰할 수 있다. 음성염색을 하는 산성염료는 음전하로 하전된 발색단(chromophore)(염료나 색소의 발색의 원인이 되는 유기화합물에 포함된 원자단)을 갖고 있기 때문에 대게 음전하로 하전된 세포성분과 친화력이 없으며 단순히 세포주위에 머물러 있다. India ink와 nigrosin이 세포의 음성염색에 자주 이용된다.

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