분자생물학 Cloning 결과

소개글

Cloning 에이플러스받은 리포트

목차

[1] 실험과정 :
[2] 결과 :
[3] 고찰 :

본문내용

DNA 1 μl
F.P 0.5 μl
R.P 1 μl
dNTP 1 μl
10x buffer 2 μl
ddH₂O 14 μl
total 20 μl

①Microfuge tube에 실험에 사용할 재료들을 넣고 Pipette로 잘 섞어준다.

② Mineral oil을 첨가한다. (생략 가능)
- 90℃ 이상으로 온도가 올라가 oil을 넣지 않으면 증발할 수도 있다.

③ 혼합한 사료를 PCR 기계에 넣고 PCR을 시작한다.

Cycle
94℃ 5min
56℃ 45sec X 30 cycle
72℃ 1min
72℃ 7min
4℃ ∞
- 처음 cycle의 denaturation 시간은 확실한 변성을 위해 길게 해준다.
- 마지막 cycle의 polymerization 시간은 길게 해준다.
cycle이 계속되면서 효소 활성이 감소할 수도 있고, DNA 산물이 점점 많아지기 때문이 다.

참고 자료

전상학. 2008. 생명과학 8판. 바이오사이언스. 398~428
김명원. 2008. 생명과학 6판. 라이프사이언스. 210~226
민봉희. 2004. 생명의 탐구. 월드사이언스. 145~207
이형무. 2003. 유전자 클로닝 입문 4판. 월드사이언스. 3~179
정해영. 2000. 유전자와 DNA의 최첨단. 월드사이언스. 40~60
생명과학개론 편찬위원회. 2005. 생명과학 개론. McGrawHill Korea. 158~161