DNA분리 및 RAPD PCR과 전기영동

목차

1. 실험방법 및 재료
2. 결과
3. 고찰

본문내용

● 실험방법 및 재료

실험1] 식물체에서 DNA 분리하기
준비물: 여러 종의 식물(깻잎, 배추, 상추, 청경채)의 잎, 막자, 막자사발, 50ml falcon튜브, 1.5ml 튜브, 마이크로피펫, 원심분리기, 액체질소, CTAB Buffer, Chloroform : Isoamylalcohol=24 : 1 용액, Isopropanol, 70% EtOH, D.W.

실험방법
1. 식물의 잎을 잘게 찢은 후 막자사발에 액체질소와 같이 넣고 잘게 빻아 가루로 만든다.
2. 빻은 가루를 falcon튜브에 넣고, 액체질소가 다 날아갈 때까지 기다린 후 CTAB Buffer를 20ml 넣는다.
3. 가루와 잘 섞이게끔 세게 흔들고 60℃ dry oven에 15~20분 정도 넣어 놓는다.
4. 1.5ml 튜브에 500㎕씩 분주한다.
5. Chloroform : Isoamylalcohol=24 : 1 용액을 500㎕ 넣고 잘 섞일 수 있도록 새게 흔든다.
6. 10000rpm에서 5분간 원심분리 한다.
7. 상층액만 분리하여 새 1.5ml 튜브에 옮긴다.
8. 분리한 상층액에 Isopropanol을 2~2.5배정도의 양을 넣고 살살 흔들어 섞은 후 냉동실에 10분간 보관한다.
9. 10분 후 10000rpm에서 10분간 원심분리 한다.

참고 자료

박기룡 외7인, 『식물분류학-계통학적 접근』 (도서출판 신일북스), 420~423p
http://www.yanghwajin.co.kr/zboard/view.php?id=forum&no=510 - 청경채
[위키백과] 장미군(Rosids)
[네이버 지식백과] 십자화과 [Cruciferae/Brassicaceae] (두산백과)
[네이버 지식백과] 십자화목 [capparales, 十字花目, じゅうじかもく] (농촌진흥청, 농촌진흥청)