뷰렛 및 브래드포드법을 이용한 우유 단백질 정량분석

목차

1. 실험 목적 및 원리
2. 실험 방법
3. 실험 결과
4. 고 찰
5. 결 론

본문내용

실험 목적 및 원리

인체구성 성분 중 단백질은 물 다음으로 많은 양이며, 근육, 피부 등의 주성분일 뿐 아니라 신체에서 중요한 기능을 하는 효소와 호르몬을 구성한다. 사람은 간단한 질소화합물로부터 단백질을 합성할 수 없으며, 몇몇 아미노산은 신체 내에서 합성이 불가능하여 반드시 식품으로부터 섭취해야만 단백질의 합성이 가능해진다. 그렇기 때문에 섭취하고자 하는 식품에 단백질이 함유되어 있는지, 그 양은 어느 정도인지 파악하는 것은 매우 중요하다.
단백질의 정성분석방법의 하나인 Biuret 반응은 정확성은 떨어지지만 신속하게 단백질을 정성분석 및 정량할 필요가 있을 때 많이 이용되는 방법이다. Biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2)은 알칼리성 황산구리(CuSO4)와 반응하여 보라색의 착화합물을 만드는 성질이 있다.

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또한 본 실험에서는 Biuret 반응의 standard curve를 직선형으로 가정하여 시료의 단백질 함량을 구하였는데, 이 과정에서 오차가 발생했을 가능성이 있다. Biuret 반응의 standard curve에서 상관관계를 나타내는 R2의 값이 다소 감소하였음을 알 수 있는데, 이는 사용된 직선식의 정확성이 떨어지는 것이며, 이로 인해 시료의 단백질 양에 오차가 발생한 것으로 사료된다. 따라서 더 큰 농도에서 흡광도를 측정하여 standard curve의 모양과 곡선의 식을 정확하게 할 필요가 있다.
그 외에도 부피 측정, 피펫의 올바르지 않은 사용, 오랜 반응 시간으로 인한 발색의 오차 등 실험자의 조작 중 발생하는 오차도 원인이 될 수 있다.

참고 자료

이근보(2002), 식품분석, 유한문화사, p.223
한국영양학회(2009), 식품 영양소 함량 자료집, 한아름출판, 420-434
Bradford, M.(1976), A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye-binding, Anal. Biochem. 72, 248-254