단백질전기영동 예비

목차

1. 실험 목적

2. 실험 원리
Ⅰ. 생체막 (biological membrane)
Ⅱ. 지방질 (lipid)
Ⅲ. Phosphatidyl Coline
Ⅳ. 지방질의 분리와 분석

3. 실험방법

본문내용

1. 실험 목적
- 생체막의 주요 구성성분인 glycerol phosphatide 중에서 가장 대표적인 Phosphatidyl Choline(PC)를 추출한다.
- PC가 ether 또는 ethanol에는 녹지만 acetone에는 잘 녹지 않는 성질을 이용하여 지방질의 혼합물로부터 분리해 낼 수 있다.

2. 실험 원리
Ⅰ. 생체막 (biological membrane)
생체막의 구조→
: 세포의 내용물과 그 주위 또는 세포 소기관과 세포질 간의 경계적 역할(정적인 기능)과 물질의 선택적 이동이나 에너지 전환을 위한 동적인 기능을 한다. 또한 호르몬과 많은 생리적인 신호 분자들과 근절 물질들은 막과의 상호 반응을 통하여 효력을 발휘한다.

1. 생체막의 특성
1) 막은 조성이 서로 다른 칸들 사이의 밀폐된 경계를 형성하는 얇은 판과 같은 구조물
2) 주로 지방과 단백질로 구성(소량의 탄수화물 포함)

<중 략>

* 주의! 전개 용매의 윗선이 거름종이 아래의 silicagel까지 내려와서는 안되며 column 위 1 cm 까지는 항상 용매가 있어야한다.)
6. 전개용매 소량을 먼저 기벽에 흘려보낸 뒤 5 cm 정도 되면 column 높이까지 전개용매를 첨가하고 roading 시킨다.
(→ 전개용매가 휘발되지 않도록 column 입구를 은박지로 덮어둔다.)
11. Column에서 떨어지는 용매를 50 mL 삼각플라스크에 20 mL씩 받는다.
12. TLC 상으로 PC와 같은 위치의 spot이 나온 용매를 250 mL 1구 둥근플라스크에 모두 옮긴 후 evaporation으로 용매를 날리면 순수한 PC만을 추출할 수 있다.
(→ 하얀색 결정 또는 약간 투명한 gel 형태)
13. 용매를 모두 날리고 나온 흰색의 PC는 labeling을 하여 은박지로 입구를 막아 냉동보관한다.

참고 자료

없음