Cloning of PCR products
- 최초 등록일
- 2013.10.14
- 최종 저작일
- 2012.10
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목차
1. Cloning
2. Vector
3. PCR products
4. TA Cloning
5. TOPO TA Cloning
6. Gateway Cloning
7. LIC(Ligation-Independent Cloning) Vector
본문내용
Clone: 특정의 유전자형 갖는 균일의 개체군
특정 유전자나 특정 DNA절편 분리해 vector에 연결, 숙주세포에 도입한 뒤 숙주세포의 복제기구 이용해 대량증식
<중 략>
LIC Vector는 비 상보적인 single strand 12~15 염기를 양 말단에 가진 plasmid vector LIC Vector의 single strand 돌출부위에 상보 적인 특정 염기서열(12~15 염기)을 5’말단에 추가한 primer로 목적유 전자를 PCR로 증폭한다. 그 증폭단편에 한 종류의 특정한 dNTP 존재 하에 T4 DNA Polymerase를 작용시킨다.
참고 자료
36 37.. Life Science & Biotechnology
Engler, M.J. and Richardson, D.C. 1982. DNA ligases. In The Enzymes, Vol. 15B (P.D. Boyer, ed.) pp. 3-30. Academic Press, San Diego.
Chonghui and Stewart Shuman. 2000. DNA strand transfer catalyzed by vaccinia topoisomerase: ligation of DNAs containing a 3’mononucleotide overhang. Nucleic Acid Research, Vol. 28 No.9. p1893-1898. Oxford University Press.