클로닝의 전과정

목차

1. Construction of Recombinant Vector
2. Transfection
3. Transduction

본문내용

Cloning
분자 생물학에서 클로닝이란 DNA fragment를 재조합 DNA 기술을 이용하여 증폭시키는데 그 의미를 두고 있다. 만약 DNA fragment가 명확하고, 완벽한 유전자라면 이러한 과정을 gene cloning 이라 부른다.

Construction of Recombinant Vector

DNA fragment를 insert 시키기 위해서 vector는 꼭 linear해야 한다.
restiction enzyme을 이용하여 linear한 DNA fragment와 linear한 Vector를 제작하여 insertion 시킨다.

DNA fragment를 만들기 위해서는 우선적으로 interest DNA를 제작 및 증폭을 시켜야 하는데 이때 PCR(Polymerase chain reaction)을 사용한다. PCR의 원리는 크게 1.Denaturation 2.Annealing 3.Extension 세가지로 나누는데 첫번째 Denaturation은 Double strand DNA를 heat shock을 주어 single strand DNA로 분리시키는데 목적이 있다. 두번째 Annealing에서는 single strand DNA들에 내가 원하는 intersest DNA의 primer(forward, reverse)를 부착 시키는데 의의가 있다.

참고 자료

없음