Lab 5. 단백질 침전법

목차

1. 실험 배경
2. 실험 재료
3. 실험 방법
3. 참고문헌

1. 실험목적
2. 실험재료 및 기구
3. 실험 방법
4. 실험결과
5. Discussion
6. 참고문헌

본문내용

1. 실험 배경

1) 여러가지 단백질 침전법

① Ammonium sulfate(염석)에 의한 침전 (사용할 것)

② 유기용매의 의한 침전
: 단백질용액에 ethanol이나 acetone등을 가하면 이들 유기용매가 단백질에 수화된 물을 제거하므로 단백질은 응집되어서 침전된다.

③ Alkaloid 시약에 의한 침전
: 단백질은 alkaloid시약(trichloroacetic acid, tannic acid, picric acid, sulfur salicylic acid) 에 의해 응집, 침전한다. 이 현상은 산의 음이온에 의한 침전반응이므로 단백질 입자가 양하전으로 되도록 용액을 산성으로 해야 한다.

<중 략>

3) 실험과정 설계에서의 오류

이번 실험은 Ammonium sulfate를 이용하여 단백질이 농축됨을 확인하기 위한 실험이었는데, 우리는 그 실험설계를 잘못하여, 그 결과값이 처음과 농축 후의 단백질 양이 같아야만 하는 실험이 되어 버렸다. 게다가 실험 미숙으로 너무나도 많은 Loss가 생겨서 너무나도 적은 2.7g정도가 나왔다. 실험설계상 처음 넣은 우유를 10ml로 했다면, 2배 농축이 되고, Loss가 생기더라도 농축이 되는 것을 확인할 수 있는 실험이 될 것같다.
4) 실험과정상 실수.

① 첫 번째 실수

우리 조는 처음에 Ammonium sulfate과정 후 생긴 응고된 덩어리를 모두 단백질이라 생각하고 최대한 그것만을 순수하게 분리하기 위한 실험을 진행하고 있었다. 하지만 뒤늦게 그것을 이물질이란것을 알고 분리하던것을 다시 모아 처음 단계로 돌아갔으나, 이미 Tip과 Tube에 많은 단백질들이 묻어 손실 되었다.

② 두 번째 실수

단백질을 순수하게 분리하기 위한 과정에서 우리는 단백질이 녹아 있을꺼라 생각지 못하고 응고된 덩어리를 단백질이라 생각하고 그 것을 분리한 뒤 그 흡광도를 측정하려했다. 하지만 측정하는 과정에서 그 이상을 발견하고, 다시 이전과정으로 돌아가서 다시 실험하였다.

참고 자료

<식품분석-이론 및 실습> / 조덕제 / 지구문화사
http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=hwanzzang78&logNo=80003998429
간호학대사전, 대한간호학회편, 한국사전연구사
생화학실험서 / 김영희 / 아카데미서적
단백질공학 입문 / 高山光男 / 월드사이언스