RNA extraction

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최종 저작일: 2013.04; 2페이지/ 한컴오피스; 가격 1,500원

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sample은 cell을 따서 PBS washing까지 한 상태에서 micro test tube에 넣어 냉동실에 보관해둔 것을 사용. (PBS washing은 RNA의 degradation을 일으킬 수 있으므로 바로 trizol을 처리하는게 좋다.)

※ RNA 자체가 불안정하므로 실험에 사용되는 micro test tube나 tip은 멸균된 것을 바로 사용한다.

Trizol은 산성용액으로 DNA,RNA, Protein은 모두 산성에서 변성된다. DNA는 변성되면 phenol, chloroform, trizol층으로 녹아 들어가 된다. Trizol의 성분중 guandine isothiocyanate와 phenol은 강력한 RNA 억제제 인데, Trizol에 있을 때는 RNase는 억제된다. 단 RNA를 물에 녹인 경우 RNase의 억제가 비활성되므로 주의한다.
acid phenol과 같은 기능을 한다. 단백질 변성, 지질성분을 녹여 세포막 파괴
강한 산성에서 DNA는 변성 되지만 RNA는 파괴가 덜하다. DNA는 알칼리에서 안정, RNA는 가수분해된다.

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