DNA의 젤 전기영동법, 제한효소절단

목차

1. DNA의 젤 전기영동법
2. 핵산의 전기적 성질
3. 제한효소의 DNA 단편화와 vector에의 결합

본문내용

DNA의 젤 전기영동법
염색체 DNA, 벡타DNA, 또는 이것을 적당한 크기로 절단한 뒤 DNA단편을 분리, 정제하는 방법으로 겔 전기영동법이 있다. 전기영동법에 의한 DNA분획은 칼럼으로 분획하는 것과 비교하여 손쉽고, 단시간에 실행할 수가 있다. 젤 전기영동법에는 폴리아크릴아미드 겔을 사용하는 경우와 아가로스 겔을 사용하는 경우가 있고, 1kb이하의 비교적 저분자 DNA를 분획하는 경우는 전자를 , 1kb 이상의 고분자 DNA를 분획하는 경우는 후자를 사용하는 것이 보통이다. 특정 DNA 단편을 분리시킨 뒤 그 DNA를 클로닝 하기도 하고 염기배열을 결정하기도 하고 또는 sourthern hybridization을 하는 때에 사용된다.
종래까지는 통상의 아가로스 겔 전기영동법으로 분리가능한 것을 50kb 이하의 DNA였지만, 최근 pulse field 전기영동법에 의해 그 이상의 DNA도 분리가 가능하다.
핵산의 전기적 성질
중성 또는 알칼리성의 조건에서 DNA는 음전하를 띠고 있다. 이 때문에 전기영동을 하면 DNA는 양극쪽으로 이동한다. 실제 DNA를 겔에서 통과시키면 DNA분자가 젤속으로 통과하기 쉬움의 정도에 따라 각각의 DNA 분자의 이동도에 차이가 생긴다. 한가닥 직선형의 DNA는 염기의 구성성분에 극단적인 차가 없는 한, 분자량이 작은 것일수록 잘 이동하고, 분자량이 큰 것은 이동도가 작다.

참고 자료

없음